تجزیه و تحلیل PCR، افراد زیادی نمی دانند که چیست، اگرچه امروزه یکی از روش های ابتکاری برای تشخیص بیماری های عفونی است که توسعه دهنده آن در سال 1993 جایزه نوبل را دریافت کرد. این روش پیشرفته به شما امکان می دهد بیماری های جدی را در مراحل اولیه تشخیص دهید و درمان آنها را به موقع شروع کنید.
تجزیه و تحلیل بر اساس اصول زیست شناسی مولکولی است. تحقیقات PCR شامل استفاده از یک آنزیم ویژه است که تحت تأثیر شرایط دما، RNA و DNA باکتری ها و ویروس های موجود در بیومتریال جمع آوری شده را کپی می کند. چنین تولید مثل انبوهی به پزشک اجازه می دهد تا دقیقاً تعیین کند که باکتری عامل بیماری متعلق به کدام گونه است و همچنین سطح غلظت آن را در ماده زیستی اندازه گیری کند. روش کپی در یک دستگاه خاص انجام می شود - یک چرخه حرارتی، که لوله های آزمایش را با مواد جمع آوری شده گرم و خنک می کند و شرایط مناسبی را برای تکرار ایجاد می کند.
آزمایش PCR به دلایل زیادی انجام می شود، اما اغلب برای تعیین وجود بیماری های عفونی مانند:
- تبخال؛
- عفونت های مقاربتی - کلامیدیا، اوره پلاسموز، گاردنرلوز، تریکومونیازیس؛
- کاندیدیازیس؛
- هپاتیت؛
- مونونوکلئوز؛
- لیستریوز
- سیتومگالوویروس؛
- بیماری سل؛
- ویروس پاپیلوم انسانی؛
- آنسفالیت ناشی از کنه
تجزیه و تحلیل PCR به کاربرد آن در پزشکی محدود نمی شود؛ غربالگری اغلب در صورتی انجام می شود که لازم باشد بفهمیم که چه کسی مالک مواد بیولوژیکی یافت شده در صحنه جرم است، یعنی تجزیه و تحلیل PCR به طور گسترده در علم پزشکی قانونی استفاده می شود. لازم به ذکر است که در صورت نیاز به اثبات پدری، برای PCR اسمیر یا خون گرفته می شود. نتایج تشخیص PCR به هیچ وجه کمتر از تجزیه و تحلیل معمول DNA خویشاوندی نیست و بسیار ارزان تر است.
ویژگی های تشخیصی
تجزیه و تحلیل PCR دارای تعداد زیادی از جنبه های مثبت است. قبل از هر چیز، توجه به حساسیت تست مهم است. آنالایزر PCR قادر است مولکول های DNA باکتری را حتی در مقادیر کم تشخیص دهد، یعنی پزشک اطلاعاتی در مورد مراحل اولیه بیماری یا شروع یک نوع مزمن بیماری دریافت می کند. آزمایش خون PCR حتی می تواند وجود یک بیماری عفونی را که به صورت نهفته است و به هیچ وجه خود را نشان نمی دهد، مشخص کند.
لازم به ذکر است که آنالیز PCR در مردان و زنان در حضور هر نوع ماده ای قابل انجام است، لازم نیست خون یا اسمیر، بزاق، سلول های پوست و حتی ادرار انجام شود.
نتایج آزمایش‌های PCR می‌تواند گسترده باشد، زیرا تشخیص PCR عفونت‌ها می‌تواند فوراً چندین پاتوژن را که در یک نمونه از مواد زیستی یافت می‌شوند، ضبط کند. معاینه را می توان در هر زمان مناسب تکمیل کرد، که تجزیه و تحلیل نشان می دهد که فرد می تواند در مدت زمان کوتاهی متوجه شود، زیرا نتایج تشخیصی بیومتریال در عرض 5 ساعت آماده می شود.
همه پزشکان موافق هستند که اگر روش تشخیصی به درستی دنبال شود، آزمایش خون برای PCR یا مواد دیگر هرگز نتایج کاذب نمی دهد. PCR مثبت یا PCR منفی تنها در صورتی می تواند کاذب باشد که کارکنان آزمایشگاه از سطح بالایی از حرفه ای بودن برخوردار نباشند. اگر بیومتریال ضبط شده آلوده یا به اشتباه ذخیره شده باشد، ممکن است تفسیر تجزیه و تحلیل PCR نتایج را مخدوش کند.
آماده شدن برای تشخیص
در صورت نیاز به تشخیص بیماری های مقاربتی، به عنوان مثال، کلامیدیا، اورهاپلاسما یا تبخال، از دهانه رحم زنان اسمیر PCR گرفته می شود. اگر آزمایش PCR برای این باکتری ها بر روی مرد مورد نیاز باشد، ترشحی از مجرای ادرار از او گرفته می شود - به عبارت دیگر آب پروستات. اگر بخواهند هپاتیت، توکسوپلاسموز و اچ آی وی را تعیین کنند، خون با استفاده از روش PCR آزمایش می شود. آزمایش PCR برای مونونوکلئوز و سیتومگالوویروس با برداشتن سواب از گلو انجام می شود. واکنش زنجیره ای پلیمراز برای حضور عفونت های ریوی با حضور مواد زیستی مانند خلط یا مایع پلور انجام می شود.
در صورت مشکوک بودن به عفونت های داخل رحمی و همچنین بیماری ها و آسیب شناسی های سیستم عصبی جنین، PCR در دوران بارداری انجام می شود. بافت جفت از زن باردار به عنوان بیومتریال برای تحقیق گرفته می شود. اگر فرد آسیبی به سیستم عصبی داشته باشد، مایع مغزی نخاعی بررسی می شود. برای شناسایی باکتری هایی مانند هلیکوباکتر پیلوری از بیوپسی معده و دوازدهه استفاده می شود.
آزمایش ادرار PCR نیز اغلب مورد استفاده قرار می گیرد، اما ارجحیت کمتری نسبت به آزمایش خون دارد. این به شما امکان می دهد حضور میکروارگانیسم های بیماری زا را مشاهده کنید که باعث تحریک بیماری های عفونی می شوند، اما نمی توانند تعداد دقیق آنها و درجه توسعه بیماری را نشان دهند. در صورتی که به دلایلی امکان برداشتن خون یا ایجاد اسمیر وجود نداشته باشد از PCR ادرار استفاده می شود. همچنین لازم به ذکر است که از PCR ادرار می توان برای بررسی عفونت در کودکان خردسال استفاده کرد. آزمایش ادرار همچنین می تواند وجود عفونت و التهاب در مثانه را تعیین کند، سنگ، شن و ماسه و همچنین سیستیت و اورتریت را تعیین کند.
همانطور که در بالا ذکر شد، در صورت داشتن هر گونه بیومتریال، می توانید آزمایش PCR را انجام دهید. تجزیه و تحلیل PCR، شما می دانید که چیست، همچنین باید بدانید که چگونه برای تشخیص آماده شوید. آماده سازی مستقیماً به چیزی که باید برداشته شود بستگی دارد؛ به عنوان مثال، شما باید پس از بهداشت دقیق اندام تناسلی در صبح، ادرار را اهدا کنید. خون با معده خالی اهدا می شود، در حین اهدا یا بهتر است بگوییم روز قبل، باید مصرف هرگونه دارویی را قطع کنید. در صورت وجود بیماری های مزمن، لیست داروهای مورد تایید برای استفاده به صورت جداگانه توسط پزشک معالج تعیین می شود.
تجزیه و تحلیل مدفوع در صبح پس از آماده سازی دقیق انجام می شود. در آستانه انجام آزمایش پرهیز از غذاهای سنگین و رعایت بهداشت کامل اندام تناسلی ضروری است. تجزیه و تحلیل مدفوع غیر قابل اعتماد خواهد بود اگر بیومتریال با استفاده از تنقیه برداشته شود، نزول طبیعی مواد ضروری است. برای اهدای بزاق نیازی به آمادگی نیست، فقط کافی است سیگار یا آب مرکبات را ترک کنید.
قبل از ارسال بیومتریال برای تعیین بیماری هایی که از طریق رابطه جنسی منتقل می شوند، بیماران باید دو روز قبل از تشخیص PCR از تماس جنسی خودداری کنند. زنان دو روز پس از قاعدگی از گرفتن اسمیر دهانه رحم در دوران قاعدگی منع می‌شوند، در غیر این صورت تفسیر PCR اطلاعات مخدوشی خواهد داشت.
نتایج غربالگری
فقط یک پزشک واجد شرایط می تواند با جزئیات توضیح دهد که تجزیه و تحلیل PCR در مورد وضعیت یک بیمار خاص چه می گوید؛ درک مستقل داده های نشان داده شده در فرم آسان نخواهد بود. اگر از پزشک بخواهید که داده ها را رمزگشایی کند، اول از همه می گوید که نتیجه مثبت است یا منفی. اگر آنالیز منفی باشد، به این معنی است که فرد سالم است و هیچ باکتری در مواد آزمایش یافت نشد. در صورت نتیجه مثبت، نوع دقیق پاتوژن و مقدار آن مشخص می شود؛ همچنین می توانید با وجود ایمونوگلوبولین های خاص، دوره دقیق بروز عفونت را نیز دریابید.
چندین کلاس از ایمونوگلوبولین ها وجود دارد که می توانند به وضوح وضعیت بیمار را منعکس کنند:
- IgG طی 4 هفته پس از عفونت در خون ایجاد می شود و می تواند تا چندین سال در خون باقی بماند. آنها همیشه نشانگر باکتری نیستند؛ گاهی اوقات به عنوان حافظه بدن عمل می کنند که زمانی با نوع مشابهی از پاتوژن مواجه شده است.
- IgM - در همان ابتدا پس از عفونت ظاهر می شود. به عنوان یک قاعده، آنها در روز پنجم قابل مشاهده هستند؛ اینها اولین مدافعان بدن هستند که به باکتری حمله می کنند. آنها پس از دو هفته از نتیجه خون ناپدید می شوند. اگر آنها در آزمایش خون وجود داشته باشند، می توان فرض کرد که عفونت کاملاً اخیراً، حدود یک هفته پیش رخ داده است.
- IgA نشان دهنده توسعه حاد عفونت باکتریایی در بدن یا مرحله عود یک بیماری مزمن است.
یکسری موارد وجود دارد که تجزیه و تحلیل نتیجه مثبت را نشان می دهد، اما فرد اصلا احساس بدی ندارد. این به هیچ وجه نشان دهنده خطای تشخیصی نیست، بلکه یک شکل مزمن از بیماری وجود دارد که غیرفعال است یا پیشرفت بیماری تازه شروع شده است. در این زمان، باکتری کافی وجود ندارد که بتواند علائم را تحریک کند.
اکنون اصل تجزیه و تحلیل را می دانید و در صورت وجود کوچکترین شک به بیماری عفونی می توانید برای این تشخیص اقدام کنید. مدت زمان درمان بیشتر و اثربخشی آن مستقیماً به سرعت تشخیص شما بستگی دارد که عملاً بدون درد است. به منظور حفظ مداوم سلامتی خود در سطح خوب، توصیه می شود سالی یک بار برای وجود بیماری های مقاربتی و همچنین عفونت سایر اندام ها تحت تشخیص PCR پیشگیرانه قرار بگیرید. بهتر است از یک بیماری پیشگیری کنیم تا اینکه بعداً با عواقب آن مقابله کنیم.
واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) روشی با دقت بالا در زمینه تشخیص پاتولوژی های ارثی، عفونت ها، بیماری های ویروسی در هر مرحله (حاد یا مزمن) و همچنین - در مراحل اولیه - قبل از تظاهرات آشکار بیماری با شناسایی است. پاتوژن ها بر اساس DNA، RNA، که ماده ژنتیکی هستند، در نمونه های به دست آمده از بیمار. و امروز در مورد ماهیت، مراحل تشخیصی و اصول روش های واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) و همچنین هزینه آن صحبت خواهیم کرد.
واکنش زنجیره ای پلیمراز چیست؟
اساس تجزیه و تحلیل تقویت (دوبرابر شدن) است - ایجاد بسیاری از کپی ها از بخش کوتاهی از DNA (دئوکسی ریبونوکلئیک اسید)، که نشان دهنده مجموعه ژنتیکی انسان است. این مطالعه به مقدار بسیار کمی ماده فیزیولوژیکی (خلط، مدفوع، خراشیدن اپیتلیال، آب پروستات، خون، اسپرم، مایع آمنیوتیک، مخاط، بافت جفت، ادرار، بزاق، مایع جنب، مایع مغزی نخاعی) نیاز دارد. در این مورد، برای مثال، حتی یک میکروب مضر را می توان در دستگاه تناسلی ادراری بیمار تشخیص داد.
تکنیک PCR (واکنش زنجیره ای پلیمراز) توسط دانشمند آمریکایی K. Mullis که در سال 1993 جایزه نوبل را دریافت کرد، توسعه یافت.
به طور فعال استفاده می شود:
- در تشخیص زودهنگام عفونت ها، ژنتیکی؛
- در معاینه پزشکی قانونی زمانی که مقدار بسیار کمی از DNA برای معاینه موجود باشد.
- در دامپزشکی، داروسازی، زیست شناسی، ژنتیک مولکولی؛
- برای شناسایی یک فرد توسط DNA، تایید پدری؛
- در دیرینه شناسی، مردم شناسی، بوم شناسی (هنگام نظارت بر کیفیت محصولات، عوامل محیطی).
این ویدیو با جزئیات به شما می گوید که واکنش زنجیره ای پلیمراز چیست:
برای چه کسانی تجویز می شود؟
واکنش زنجیره ای پلیمراز در تشخیص بیماری های عفونی یکی از مطمئن ترین روش ها با دقت و اطمینان خاصی است. به عنوان مثال، قابلیت اطمینان تجزیه و تحلیل PCR برای کلامیدیا و بسیاری از عوامل بیماری زا نزدیک به 100٪ (مطلق) است. اغلب، روش واکنش زنجیره ای پلیمراز برای بیمارانی تجویز می شود که در تشخیص یک پاتوژن خاص مشکل دارند.
از آزمایش PCR آزمایشگاهی استفاده می شود:
- برای شناسایی پاتوژن هایی که باعث عفونت اندام های ادراری و تناسلی می شوند که شناسایی آنها با استفاده از روش های کشت یا ایمونولوژیک دشوار است.
- برای تشخیص مجدد HIV در مرحله اولیه در صورت مثبت اما مشکوک بودن نتیجه آزمایش اولیه (به عنوان مثال، در نوزادان از والدین آلوده به ایدز).
- برای شناسایی سرطان در مراحل اولیه (مطالعه جهش های انکوژن) و تنظیم فردی رژیم درمانی برای یک بیمار خاص.
- به منظور تشخیص زودهنگام و درمان بالقوه پاتولوژی های ارثی.
بنابراین، والدین آینده آزمایشی را انجام می دهند تا بفهمند که آیا ناقل یک آسیب شناسی ژنتیکی هستند یا خیر؛ در کودکان، PCR احتمال قرار گرفتن در معرض بیماری های منتقله از طریق ارث را تعیین می کند.
- برای تشخیص آسیب شناسی جنین در مراحل اولیه بارداری (سلول های فردی جنین در حال رشد برای وجود جهش های احتمالی بررسی می شوند).
- در بیماران قبل از پیوند عضو - برای "تایپ بافت" (تعیین سازگاری بافت).
- شناسایی ارگانیسم های بیماری زا خطرناک در خون اهدایی؛
- در نوزادان - برای شناسایی عفونت های پنهان؛
- برای ارزیابی نتایج درمان ضد ویروسی و ضد میکروبی.
چرا تحت چنین روشی قرار می گیرید؟
از آنجایی که PCR یک روش تشخیصی بسیار مؤثر است که تقریباً 100٪ نتیجه می دهد، از روش زیر استفاده می شود:
- برای تایید یا حذف تشخیص نهایی؛
- ارزیابی سریع اثربخشی درمان
در بسیاری از موارد، در صورت بی فایده بودن سایر روش های تشخیصی باکتریولوژیک، ایمونولوژیک و ویروس شناسی، PCR تنها آزمایش ممکن برای تشخیص بیماری در حال توسعه است.
- ویروس ها با استفاده از روش PCR بلافاصله پس از عفونت و قبل از ظاهر شدن علائم بیماری شناسایی می شوند. تشخیص زودهنگام ویروس امکان درمان سریع را فراهم می کند.
- به اصطلاح "بار ویروسی" (یا تعداد ویروس ها در بدن) نیز با تجزیه و تحلیل DNA با استفاده از روش کمی تعیین می شود.
- پاتوژن های خاص (به عنوان مثال، باسیل سل کوخ) دشوار است و کشت آن بسیار طولانی است. آزمایش PCR امکان تشخیص سریع حداقل پاتوژن ها (زنده و مرده) را در نمونه های مناسب برای آزمایش فراهم می کند.
تجزیه و تحلیل دقیق DNA پاتوژن استفاده می شود:
- برای تعیین حساسیت آن به انواع خاصی از آنتی بیوتیک ها، که امکان درمان فوری را فراهم می کند.
- کنترل شیوع بیماری های همه گیر در میان حیوانات اهلی و وحشی؛
- برای شناسایی و ردیابی گونه‌های میکروبی عفونی جدید و زیرگروه‌های پاتوژن که به اپیدمی‌های قبلی دامن زده‌اند.
انواع تشخیص
روش استاندارد
تجزیه و تحلیل واکنش زنجیره ای پلیمراز بر اساس تقویت چندگانه (دوبرابر) یک قطعه خاص از DNA و RNA با استفاده از آنزیم های آغازگر ویژه انجام می شود. در نتیجه زنجیره کپی، مقدار کافی مواد برای تحقیق به دست می آید.
در طول عمل، فقط قطعه مورد نظر (مطابق با شرایط خاص مشخص شده) کپی می شود و اگر واقعاً در نمونه وجود داشته باشد.
این ویدیوی دقیق با نمودارهای مفید نحوه عملکرد PCR را توضیح می دهد:
روش های دیگر
- Real-time PCR. در این نوع تحقیقات، فرآیند شناسایی یک قطعه DNA داده شده پس از هر چرخه شروع می شود، نه پس از تکمیل کل زنجیره 30 تا 40 چرخه. این نوع تحقیقات به شما امکان می دهد اطلاعاتی در مورد میزان یک پاتوژن (ویروس یا میکروب) در بدن به دست آورید، یعنی یک تجزیه و تحلیل کمی انجام دهید.
- RT-PCR (حالت رونویسی معکوس). این آزمایش برای جستجوی RNA تک رشته ای برای شناسایی ویروس هایی که پایه ژنتیکی آنها RNA است (به عنوان مثال، ویروس هپاتیت C، ویروس نقص ایمنی) استفاده می شود. در این مطالعه از یک آنزیم ویژه - ترانس کریپتاز معکوس و یک پرایمر اختصاصی استفاده شده و DNA تک رشته ای بر اساس RNA ساخته شده است. سپس دومین رشته DNA از این رشته بازیابی شده و روش استاندارد انجام می شود.
نشانه هایی برای آزمایش
روش PCR در کلینیک بیماری های عفونی، نوزادان، مامایی، اطفال، اورولوژی، زنان، ونرولوژی، نورولوژی، نفرولوژی و چشم پزشکی استفاده می شود.
نشانه های آزمایش:
- تعیین خطر ابتلا به ناهنجاری های ژنتیکی در کودک با احتمال آسیب شناسی ارثی؛
- تشخیص هر دو والدین هنگام برنامه ریزی برای بارداری یا وضعیت جدی مادر در طول حاملگی در حال انجام؛
- مشکلات لقاح، شناسایی علل ناباروری؛
- سوء ظن به عفونت های مقاربتی در مرحله حاد و با علائم انتقال آنها به مزمن.
- تشخیص علل فرآیندهای التهابی با منشا ناشناخته؛
- تماس های جنسی گاه به گاه و منظم محافظت نشده؛
- تعیین حساسیت یک میکروارگانیسم بیماری زا به آنتی بیوتیک های خاص؛
- بیماران مشکوک به عفونت پنهان برای شناسایی عوامل بیماری زا قبل از ایجاد علائم واضح (تشخیص بالینی).
- بیماران برای تایید بهبودی پس از بیماری (تشخیص گذشته نگر)؛
در صورت لزوم شناسایی دقیق پاتوژن های زیر نیز از تشخیص استفاده می شود:
- ویروس های هپاتیت (A B C G)، نقص ایمنی انسانی، سیتومگالوویروس؛
- ویبریوکلرا؛
- ویروس هرپس سیمپلکس، گونه هرپتی فرم؛
- یکپارچهسازی با سیستمعامل - آدنو - و راینوویروسها؛
- ویروس سرخجه، اپشتین بار، واریسلا (زوستر)؛
- پاروو و پیکورنوویروس ها؛
- باکتری هلیکوباکتر پیلوری؛
- لژیونلا، انواع بیماریزای اشریشیا کلی؛
- استافیلوکوکوس اورئوس؛
- بیماری زا؛
- کلستریدیا، دیفتری و هموفیلوس آنفولانزا؛
همچنین برای تعیین عفونت استفاده می شود:
- مونونوکلئوز عفونی؛
- بورلیوز، لیستریوز، آنسفالیت ناشی از کنه؛
- کاندیدیازیس ناشی از قارچ کاندیدا؛
- عفونت های مقاربتی - تریکومونیاز، اوره پلاسموز، ترپونما پالیدوم، گاردنرلوز، سوزاک، مایکوپلاسموز، کلامیدیا.
- بیماری سل.
موارد منع مصرف برای
از آنجایی که این روش با بیمار انجام نمی شود، بدون هیچ گونه تاثیری بر بدن، اما با مواد بیولوژیکی که برای تحقیق گرفته شده است، به دلیل عدم وجود خطر بالقوه، منع مصرف PCR وجود ندارد.
با این حال، پس از کولپوسکوپی، مواد زیستی از کانال دهانه رحم جمع آوری نمی شود. ارسال اسمیر و خراش برای تجزیه و تحلیل تنها 4-6 روز پس از پایان قاعدگی و توقف کامل ترشح مجاز است.
آیا روش بی خطر است؟
هیچ تأثیر منفی بر روی بیمار در طول مطالعه ایزوله از بیوماد او در آزمایشگاه امکان پذیر نیست.
آماده سازی برای روش (ارائه مواد بیولوژیکی برای تجزیه و تحلیل)
هر مایع بیولوژیکی، بافت یا ترشحات بدن به عنوان نمونه ای برای آنالیز PCR عمل می کند که DNA یک پاتوژن خارجی را تشخیص می دهد. ماده آزمایش به صورت خون گیری از ورید، خراشیدن از حنجره، حفره بینی، مجرای ادرار، حفره پلور، دهانه رحم گرفته می شود.
قبل از روش تشخیصی، پزشک به بیمار توضیح می دهد که چه موادی جمع آوری می شود:
- هنگام بررسی عفونت های مقاربتی، ترشحات اندام تناسلی، ادرار و اسمیر از مجرای ادرار جمع آوری می شود.
- هنگام تجزیه و تحلیل عفونت های تبخال، سیتومگالوویروس، مونونوکلئوز، ادرار و سواب گلو برای تجزیه و تحلیل گرفته می شود؛ برای هپاتیت، توکسوپلاسموز، خون از ورید گرفته می شود.
- به منظور تشخیص انواع مختلف، مایع مغزی نخاعی جمع آوری می شود.
- در ریه، نمونه برای تجزیه و تحلیل خلط و مایع جنب است.
- هنگام انجام مطالعه عفونت های داخل رحمی احتمالی در دوران بارداری، از مایع آمنیوتیک و سلول های جفت برای تجزیه و تحلیل استفاده می شود.
قابلیت اطمینان و دقت آنالیز به عقیم بودن شرایط هنگام مصرف مواد بستگی دارد. از آنجایی که تست PCR بسیار حساس است، هر گونه آلودگی ماده آزمایشی می تواند نتیجه را مخدوش کند.
آماده سازی مناسب برای تحویل بیومتریال هیچ مشکلی برای بیماران ایجاد نمی کند. توصیه های خاصی وجود دارد:
- هنگام تجزیه و تحلیل عفونت های مقاربتی:
- 72 ساعت قبل از ارسال مطالب، تماس های صمیمی را حذف کنید.
- استفاده از محصولات واژینال را 3 روز قبل متوقف کنید.
- از عصر روز قبل، بهداشت منطقه مورد معاینه را انجام ندهید.
- دفع ادرار 3-4 ساعت قبل از نمونه برداری از مجرای ادرار.
- یک ماه قبل از آزمایش عفونت، مصرف آنتی بیوتیک را متوقف کنید.
- خون در صبح قبل از خوردن و آشامیدن اهدا می شود.
- اولین نمونه ادرار صبحگاهی در یک ظرف استریل پس از توالت کامل صمیمی جمع آوری می شود.
در زیر در مورد نحوه انجام تشخیص با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بخوانید.
روش کار چگونه است؟
هنگام انجام یک مطالعه PCR، چرخه های خاصی بارها و بارها در یک راکتور (تقویت کننده یا سیکلر حرارتی) تکرار می شوند:
- اولین مرحله دناتوره سازی است. بزاق، خون، مواد بیوپسی، نمونه های زنان، خلط، که در آن وجود DNA (یا RNA) یک پاتوژن مشکوک است، در یک تقویت کننده قرار می گیرد، جایی که مواد گرم می شود و DNA به دو زنجیره جداگانه تقسیم می شود.
- مرحله دوم بازپخت یا خنک شدن جزئی مواد استو افزودن پرایمرهایی به آن که بتواند نواحی مورد نظر در مولکول DNA را تشخیص داده و به آنها متصل شود.
- مرحله سوم ازدیاد طول است- پس از اتصال 2 آغازگر به هر یک از رشته های DNA رخ می دهد. در طی فرآیند، قطعه DNA پاتوژن تکمیل می شود و کپی آن تشکیل می شود.
این چرخه‌ها مانند یک «واکنش زنجیره‌ای» تکرار می‌شوند و هر بار منجر به دو برابر شدن نسخه‌های یک قطعه DNA خاص می‌شوند (به عنوان مثال، بخشی که یک ویروس خاص در آن برنامه‌ریزی شده است). در عرض چند ساعت، کپی های زیادی از قطعه DNA تشکیل می شود و حضور آنها در نمونه تشخیص داده می شود. پس از این، نتایج تجزیه و تحلیل و با داده های یک پایگاه داده از انواع مختلف پاتوژن ها برای تعیین نوع عفونت مقایسه می شود.
در زیر در مورد رمزگشایی نتایج و نتیجه گیری بر اساس واکنش PCR بخوانید.
رمزگشایی نتایج
نتیجه نهایی مطالعه 1 تا 2 روز پس از ارسال مواد بیولوژیکی صادر می شود. اغلب - در روز اول پس از تجزیه و تحلیل.
تحلیل کیفی
- منفینتیجه به این معنی است که هیچ اثری از عوامل عفونی در ماده ارائه شده برای آزمایش یافت نشد.
- مثبتنتیجه به معنای شناسایی ویروس ها یا باکتری های بیماری زا در یک نمونه بیولوژیکی با درجه دقت بسیار بالایی در زمان ارسال مواد است.
اگر نتیجه مثبت باشد، اما هیچ نشانه‌ای از افزایش عفونت تشخیص داده نشود، به این حالت بدن بدون علامت «کالسکه سالم» می‌گویند. اغلب هنگام مصرف مواد زیستی از یک مکان خاص (کانال دهانه رحم، مجرای ادرار، حفره دهان) در بیماری های ویروسی مشاهده می شود. در این مورد، درمان لازم نیست، اما نظارت مداوم پزشکی لازم است، زیرا احتمال وجود دارد:
- انتشار ویروس از ناقلین و عفونت افراد سالم؛
- فعال شدن روند و انتقال بیماری به شکل مزمن.
با این حال، اگر آزمایش خون مثبت باشد، این نشان می دهد که عفونت به بدن ضربه زده است، و این دیگر یک حالت ناقل نیست، بلکه یک آسیب شناسی است که نیاز به درمان خاص فوری دارد.
آنالیز کمی
نتیجه کمی توسط یک متخصص به طور خاص برای نوع خاصی از عفونت تعیین می شود. بر اساس آن، می توان درجه توسعه و مرحله بیماری را ارزیابی کرد که امکان تجویز سریع درمان صحیح را فراهم می کند.
هزینه متوسط
قیمت واکنش زنجیره ای پلیمراز بر اساس: نوع تحقیق، دشواری شناسایی عامل بیماری زا، دشواری جمع آوری مواد بیولوژیکی، نوع تجزیه و تحلیل (کیفی یا کمی) و سطح قیمت در آزمایشگاه تعیین می شود.
از سوی دیگر، هنگام مطالعه PCR، هنگام جمع آوری یک نوع ماده برای تجزیه و تحلیل، می توان چندین پاتوژن را به طور همزمان شناسایی کرد. این به شما امکان می دهد در سایر آزمایشات آزمایشگاهی صرفه جویی کنید.
هزینه تقریبی آنالیز PCR بر حسب روبل:
- گونوکوک، گاردنرلا، تریکوموناس واژینالیس - از 180
- کلامیدیا تراکوماتیس - از 190
- ویروس پاپیلوم - از 380 تا 500
- بیوسنوز دستگاه ادراری تناسلی در زنان (ارزیابی کمی و کیفی میکرو فلور) - از 800.
حتی اطلاعات مفیدتر در مورد آزمایش PCR در ویدیوی زیر موجود است:
در پزشکی مدرن، تجزیه و تحلیل PCR مایعات بیولوژیکی بدن بسیار دقیق و آموزنده است. با استفاده از این تجزیه و تحلیل، وجود ذرات ویروسی و میکروبی در بدن تشخیص داده می شود، حتی اگر بیماری پنهان باشد و هیچ علامتی نداشته باشد.
منظور از تجویز آزمایش PCR برای شما چیست؟ این مخفف مخفف روش واکنش زنجیره ای پلیمراز است - این یک روش خاص برای انجام تحقیقات آزمایشگاهی است. با این روش مواد بیولوژیکی به دست آمده از بیمار در دستگاه مخصوص قرار می گیرد. مجموعه ای از آنزیم های معرف به محیط آزمایش اضافه می شود که به تکثیر ماده ژنتیکی پاتوژن (ویروس یا میکروب) کمک می کند. این واکنش تعداد زیادی کپی از DNA یا RNA تولید می کند که امکان شناسایی با مقایسه با پایگاه داده عفونت های ویروسی و میکروبی را فراهم می کند.
نتیجه آزمایش PCR به چه معناست؟ اگر عامل ایجاد کننده هر عفونتی در بدن انسان وجود داشته باشد، حتی یک عامل پنهان، این تجزیه و تحلیل نه تنها وجود آن، بلکه میزان وجود این عفونت در بدن را نیز آشکار می کند.
برای آزمایش عفونت با استفاده از روش PCR، می توانید تمام مایعات بیولوژیکی بدن - خون، ادرار، بزاق، ترشحات تناسلی، مخاط گلو و بینی را بررسی کنید. تجزیه و تحلیل به مواد بسیار کمی نیاز دارد، زیرا در صورت وجود عوامل بیماری زا، با بازتولید نسخه های آنها، غلظت اطلاعات ژنتیکی به حدی می رسد که میکروب یا ویروس را شناسایی کرده و نوع آن را مشخص می کند. دقت آنالیز PCR بسیار بالاست، امروزه با کمک این آنالیز می توان تقریباً تمامی عفونت های ویروسی، میکروبی و سایر عفونت های گسترده را تعیین کرد.
اما تجزیه و تحلیل PCR اغلب چه چیزی را نشان می دهد؟ لیست عفونت هایی که با این روش قابل تشخیص هستند شامل عفونت های عفونی از جمله عفونت های خطرناک اجتماعی مانند سل یا هپاتیت B و C می باشد. همین روش می تواند عفونت HIV، عفونت کلامیدیا و اورهاپلاسما، مایکوپلاسموز دستگاه تنفسی و تناسلی را تشخیص دهد. با استفاده از این تجزیه و تحلیل، برفک دهان، واژینوز باکتریایی و تریکومونیازیس تشخیص داده می شود. قابلیت های این روش شناسایی عفونت های پنهان - انواع مختلف تبخال، HPV (ویروس پاپیلوم) و همچنین شناسایی یک میکروب خاص مسئول ایجاد زخم معده - Helicobatera را ممکن می سازد.
امروزه تقریباً در هر آزمایشگاه خصوصی یا دولتی می توانید آزمایش PCR را انجام دهید. این نوع آزمایش ها بر روی همه افراد، کودکان و بزرگسالان انجام می شود. بسته به هدف تجزیه و تحلیل، مواد بیولوژیکی مختلف بسته به جنسیت تجزیه و تحلیل می شود.
بنابراین، تجزیه و تحلیل PCR در مردان بر روی خون یا ادرار، ترشحات مجرای ادرار، مخاط از گلو یا بینی، آب پروستات یا حتی اسپرم انجام می شود. آنالیز PCR در زنان در خون و ادرار، ترشحات واژن، ترشحات مجرای ادرار، مخاط بینی و حلق امکان پذیر است.
آنالیز PCR اغلب در دوران بارداری مورد استفاده قرار می گیرد؛ با کمک آن، عفونت های پنهان در ترشحات واژینال یا خون تشخیص داده می شود که نیاز به نظارت ویژه در این دوره و گاهی اوقات درمان کافی دارد.
PCR چگونه گرفته می شود؟
آزمایش عفونت با استفاده از این روش توسط پزشک تجویز می شود؛ اغلب مواد بلافاصله در مطب پزشک - متخصص اورولوژی یا متخصص زنان جمع آوری می شود. آنالیز PCR چگونه انجام می شود؟
مواد مورد مطالعه در آزمایشگاه با معرف ها مخلوط شده و منتظر واکنش می شوند. هنگامی که پاتوژن ها وجود دارند، نسخه هایی از DNA یا RNA آنها تکثیر می شود. این دستگاه قطعات شناسایی شده از مواد ژنتیکی را با پایگاه های داده مقایسه می کند و عامل عفونی را به طور دقیق شناسایی می کند. در صورت لزوم، مقدار پاتوژن در مایعات خاص بدن نیز نشان داده می شود. به طور معمول، مطالعه بیش از 1-2 روز طول نمی کشد؛ در صورت لزوم، آزمایش های سریع انجام می شود.
تجزیه و تحلیل PCR را از کجا دریافت می کنید؟ این بستگی به نوع پاتوژن مشکوک دارد. اگر اچ‌آی‌وی یا هپاتیت باشد، خون گرفته می‌شود، اگر عفونت مقاربتی باشد، اسمیر از مجرای ادرار یا واژن گرفته می‌شود. اگر مشکوک به مونونوکلئوز یا تبخال باشد، سواب گلو گرفته می شود. از ادرار، مایع مغزی نخاعی، ترشحات زخم، خلط و ... نیز می توان استفاده کرد.
آزمایش خون PCR
برای نتایج دقیق و تشخیص عفونت ها، اهدای خون در صبح با معده خالی مهم است. آزمایش خون با استفاده از روش PCR می تواند عوامل ایجاد کننده بیماری های خطرناک - HIV، هپاتیت، سیفلیس را شناسایی کند. در طول دوره های تشدید و فعالیت ویروس، ویروس های تبخال، پاپیلوم ها و برخی دیگر در خون قابل تشخیص هستند.
تجزیه و تحلیل PCR: آماده سازی
برای دقت مطلق تجزیه و تحلیل، آماده سازی مناسب برای آن مهم است. ساده ترین راه برای آماده شدن برای آزمایش خون این است که هیچ محدودیتی در رژیم غذایی یا فعالیت وجود ندارد، خون باید صبح ها، با معده خالی گرفته شود. آزمایش ادرار پس از شستن اندام تناسلی، از قسمت میانی در یک ظرف استریل مخصوص گرفته می شود. تجزیه و تحلیل PCR از دستگاه تناسلی مستحق توجه ویژه است، بنابراین مهم است که بدانید چگونه باید آماده شود. یک روز قبل از معاینه رابطه جنسی ممنوع است، توصیه می شود قبل از معاینه ادرار نکنید. در طول قاعدگی در زنان، تاریخ تجزیه و تحلیل 3-5 روز از لحظه آخرین ترشح به تعویق می افتد.
چقدر طول می کشد تا آزمایش PCR انجام شود؟
بسته به قابلیت های آزمایشگاه، آنالیز را می توان از چند ساعت تا چند روز تهیه کرد. به طور متوسط آزمایش PCR چند روز طول می کشد؟ معمولا این یک یا دو روز است. در شرایط اضطراری، تجزیه و تحلیل را می توان در همان روز، در عرض چند ساعت انجام داد.
در بیشتر موارد، بیماران باید با موقعیتی روبرو شوند که در آن تشخیص PCR برای بررسی یا تعیین بیماری لازم است. مهم است که بدانیم چیست و چرا به آن نیاز است.
روش واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) آزمایشی است که به شناسایی بسیاری از بیماری ها در مراحل اولیه توسعه کمک می کند. ماهیت آن یافتن DNA یا RNA پاتوژن موجود در بدن است. PCR به شما امکان می دهد تا در مواردی که سایر انواع تحقیقات بی اثر هستند، پاتوژن را تعیین کنید.
محبوبیت این روش در سادگی و گستردگی استفاده از آن است. این توسط پزشکان برای تشخیص بیماری های مختلف استفاده می شود. به شما امکان می دهد تا به سرعت مطالعات کمی و ژنومی پیچیده را انجام دهید.
یکی از مهمترین کاربردهای پزشکی روش کلاسیک PCR، شناسایی میکروارگانیسم هایی است که قادر به ایجاد شرایط پاتولوژیک هستند.
ماهیت تجزیه و تحلیل PCR
تشخیص PCR (آنچه که توسط زیست شناسی مولکولی توضیح داده شده است) یک روش شبیه سازی مولکولی است که برای تجزیه و تحلیل یک توالی کوتاه از DNA استفاده می شود که در مقادیر حداقل در نمونه های حاوی هر ماده ژنتیکی وجود دارد. این روش اغلب «دستگاه کپی DNA» نامیده می شود.
تشخیص PCR در آزمایشگاه (خارج از بدن) در آزمایشگاه انجام می شود و بر اساس فرآیند طبیعی دو برابر شدن DNA قبل از تقسیم است. علاوه بر توانایی تشخیص ویروس، باکتری یا سایر میکروارگانیسم‌ها در نمونه، PCR به شما امکان می‌دهد مقدار آنها را شناسایی کنید.
برای بیماری هایی مانند ویروس هپاتیت C یا ویروس نقص ایمنی انسانی (HIV)، بار ویروسی نشانگر خوبی است که نشان می دهد بیماری کجاست و درمان چقدر موثر است.
با داشتن این اطلاعات، پزشکان می توانند زمان شروع درمان را تعیین کنند و روند را زیر نظر بگیرند. این به ما اجازه می دهد تا برای هر بیمار یک رویکرد فردی ایجاد کنیم.
تشخیص PCR شامل سه مرحله است که در هر مرحله مقدار DNA هدف به میزان قابل توجهی افزایش می یابد. در نتیجه این واکنش، بیش از یک میلیارد نسخه از DNA اصلی یا "هدف" به دست می آید که امکان ارزیابی وجود ویروس در بدن را فراهم می کند. این ویژگی اصلی روش PCR است.
مزایا و معایب روش
تشخیص PCR (آنچه که در بالا توضیح داده شد) توسط Keri Mullis در سال 1983 به تفصیل شرح داده شد. از آن زمان، این روش در عمل آزمایشگاهی بسیار محبوب شده است.
مزایای اصلی این نوع تحقیق عبارتند از:
- تطبیق پذیری؛
- سرعت نتایج؛
- احتمال بالا برای به دست آوردن نتایج قابل اعتماد؛
- اختصاصی؛
- انواع بیماری هایی که می توان آنها را شناسایی کرد.
تطبیق پذیری روش PCR در امکان استفاده از هر گونه مواد فیزیولوژیکی انسانی نهفته است. حتی یک مو برای تجزیه و تحلیل کافی است.
فرآیند پردازش داده ها، به لطف اتوماسیون، می تواند چندین ساعت طول بکشد. ویژگی شامل جداسازی یک قطعه DNA خاص مشخصه یک پاتوژن خاص است. با استفاده از آنالیز PCR می توان بسیاری از بیماری ها را چه در مرحله حاد و چه در مرحله نهفته تشخیص داد.
اما، با وجود تعداد زیادی از مزایا، روش تشخیصی PCR دارای معایبی نیز می باشد:
- احتمال نتایج مثبت کاذب؛
- حساسیت بالا؛
- تنوع میکروارگانیسم ها
عیب اصلی روش عدم توانایی PCR در تشخیص میکروارگانیسم‌های زنده از میکروارگانیسم‌های مرده است.. به عنوان یک قاعده، این به وضعیتی اشاره دارد که در آن موفقیت درمان باید ارزیابی شود. در این صورت، اگر بیماری درمان شده باشد، سلول های مرده مدتی در بدن انسان باقی می مانند و برای تجدید کامل آن مدتی از 4 تا 6 هفته طول می کشد.
حساسیت بالا یک مزیت و در عین حال یک نقطه ضعف است. برخی از میکروارگانیسم ها به مقدار کم در بدن وجود دارند. بنابراین، در این مورد، این روش تشخیصی آموزنده نیست و توصیه می شود از انواع دیگر تحقیقات استفاده شود.
هر میکروارگانیسمی می تواند جهش پیدا کند. و حتی اگر فرآیند تقویت از قطعه خاصی استفاده می کند که کمترین حساسیت را در برابر تغییرات دارد، همچنان می تواند جهش پیدا کند و برای سیستم آزمایش نامرئی شود. این وضعیت این واقعیت را توضیح می دهد که سیستم های مختلف آزمایش آزمایشگاهی می توانند نتایج کاملاً متفاوتی را نشان دهند.
این روش در چه زمینه هایی استفاده می شود؟
آزمایش PCR می تواند در عمل بالینی برای شناسایی بیماری های مختلف استفاده شود. به طور گسترده در زنان، اورولوژی، گوارش، انکولوژی و غیره استفاده می شود. علاوه بر این، به طور موثر در علم پزشکی قانونی برای ایجاد هویت و ایجاد پدری استفاده می شود.
این نوع مطالعه در مرحله برنامه ریزی و در دوران بارداری استفاده می شود. تجزیه و تحلیل عفونت TORCH به منظور تشخیص وجود عفونت در بدن یک زن انجام می شود. بیماری های ناشی از یکی از عفونت ها می تواند برای یک زن خفیف باشد، اما باعث نقص مادرزادی جدی از جمله مرگ جنین شود.
همچنین، روش تشخیصی PCR به تعیین استعداد ژنتیکی فرد برای ابتلا به برخی بیماری‌ها در آینده کمک می‌کند.
چه عفونت هایی را می توان با تشخیص PCR تشخیص داد؟
روش PCR به شناسایی ویروس ها، باکتری ها و قارچ ها کمک می کند.
شایع ترین بیماری هایی که با استفاده از آن می توان تشخیص داد:
چه مواد بیولوژیکی در حال مطالعه هستند؟
با در نظر گرفتن بیماری، علائم و اهداف مطالعه، تشخیص PCR می تواند از هر مایع فیزیولوژیکی یا ذره بافتی استفاده کند.
میتوانست باشد:
- خون؛
- بزاق؛
- خلط؛
- ادرار؛
- مدفوع
- سواب اوروفارنکس؛
- یک تکه از بافت آسیب دیده؛
- مایع سینوویال؛
- خراشیدن از واژن در زنان یا از مجرای ادرار در مردان.
- انزال
- مو و دیگران
برای بیماری های دستگاه ادراری تناسلی، ادرار یا اسمیر از واژن در زنان یا از مجرای ادرار در مردان گرفته می شود. خون وریدی برای تشخیص بیماری هایی مانند HIV، هپاتیت انواع مختلف و عفونت های TORCH اهدا می شود. 
به منظور حذف یا تایید انکولوژی، طی مداخلات جراحی، قطعات بافت برای بیوپسی برداشته می شود.
چگونه برای تجزیه و تحلیل آماده شویم
ویژگی های آماده سازی برای تحقیق به بیومتریال ارائه شده بستگی دارد. همچنین باید به یاد داشته باشید که لازم است از مصرف آنتی بیوتیک و سایر داروها خودداری کنید. برای نظارت بر اثربخشی درمان، فاصله پس از مصرف داروها باید حداقل 4 هفته حفظ شود.
خون در صبح با معده خالی اهدا می شود. ادرار و مدفوع باید در یک ظرف مشخص و کاملاً استریل قرار داده شوند. در عین حال، قبل از جمع آوری ادرار، لازم است بهداشت دستگاه تناسلی خارجی انجام شود.
اگر آزمایش اسمیر انجام می دهید، باید:
- به مدت 3 ساعت ادرار نکنید؛
- شستن و دوش گرفتن از روز قبل (برای خانم ها) توصیه نمی شود.
- قطع فعالیت جنسی یک روز قبل؛
- زنان باید در اواسط سیکل آزمایش اسمیر انجام دهند.
مراحل تحقیق PCR
قبل از شروع PCR، DNA باید از نمونه استخراج شود. استخراج DNA یک فرآیند چند مرحله ای است که می تواند به صورت دستی یا ابزاری انجام شود.
پس از آماده شدن نمونه، فرآیند سه مرحله‌ای PCR آغاز می‌شود:
- جداسازی DNA هدف (دناتوره سازی)؛
- تکثیر (تولید) قطعات DNA؛
- تشخیص (تشخیص) قطعات DNA تقویت شده.
اولین مرحله PCR دناتوراسیون نامیده می شود.ماهیت آن این است که یک لوله آزمایش با نمونه های DNA تا دمای بالا (تقریباً 90 درجه) گرم می شود. به دلیل دمای بالا، پیوندهای ضعیف بین نوکلئوتیدها که کد مولکول ها را تشکیل می دهند، از بین می روند. این منجر به تقسیم DNA یا RNA دو رشته ای به دو رشته مجزا می شود. 
برای "خالص" مطالعه، یک محلول ویژه به بیومتریال مورد مطالعه اضافه می شود که مواد آلی را حل می کند. مدت زمان این مرحله بستگی به نوع ماده مورد آزمایش و عامل عفونی دارد.
تشخیص PCR (آنچه در بالا توضیح داده شد) در مرحله دوم قطعات DNA را بر اساس DNA خود عفونت بازتولید می کند. PCR تمام اسید نوکلئیک موجود در یک نمونه را کپی نمی کند. این فقط یک توالی خاص از کد ژنتیکی، یک قطعه کوتاه (پرایمر) را کپی می کند.
در مرحله دوم لوله آزمایش خنک می شود.کل فرآیند PCR با استفاده از دستگاهی به نام ترموستات یا سیکلر خودکار می شود و می تواند در عرض چند ساعت تکمیل شود. دستگاه PCR طوری برنامه ریزی شده است که دمای مخلوط واکنش را هر چند دقیقه یکبار تغییر دهد. این اتفاق می افتد تا قطعات کوتاه بتوانند به الگوی تک رشته ای متصل شوند.
تقویت در 30-40 سیکل رخ می دهد. در این مدت پزشک آزمایشگاه قطعه DNA را کپی کرده و با استفاده از روش واکنش زنجیره ای مقدار آن را افزایش می دهد. بنابراین، با هر چرخه، تعداد نسخه ها به چندین میلیون یا حتی میلیاردها افزایش می یابد.
در مرحله سوم مطالعه، وجود DNA ویروس ها و باکتری ها تشخیص داده می شود.این کار با توزیع مخلوط حاصل و افزودن محلول مخصوص به آن انجام می شود. این مایع به قطعات DNA اجازه می دهد تا رنگ خاصی را تحت تأثیر اشعه ماوراء بنفش به دست آورند. این نشان دهنده وجود میکروب های بیماری زا در بدن انسان است.
PCR در دوران بارداری
تشخیص PCR (آنچه که در بالا توضیح داده شد) را می توان برای اولین بار در دوران بارداری تجویز کرد، زیرا این یک روش اجباری است. این روش به شناسایی عفونت های پنهان و خطر ایجاد نقص در جنین کمک می کند.
برای انجام آنالیز از:
بیماری های عفونی وجود دارد که می تواند بر رشد جنین تأثیر منفی بگذارد، باعث نقص، زایمان زودرس و سقط جنین شود. آنها به ویژه در سه ماهه اول بارداری خطرناک هستند و در بیشتر موارد نشانه پزشکی برای خاتمه بارداری هستند. این عفونت ها مجموعاً مجتمع TORCH نامیده می شوند.
تجزیه و تحلیل PCR به تعیین وجود یا عدم وجود عفونت در بدن یک زن باردار کمک می کند. اغلب در مرحله برنامه ریزی بارداری یا در سه ماهه اول انجام می شود. در صورت مثبت بودن نتیجه آزمایش مجدد لازم است. و تنها پس از تایید نتایج، درمان مناسب تجویز می شود.
PCR برای تشخیص HIV
روش PCR برای تشخیص عفونت HIV یک آزمایش گران قیمت است و برای اندیکاسیون های خاص استفاده می شود. اینها شامل اهدا می شود و همچنین می توان آن را برای بیمارانی که در تصادفات رانندگی با افراد ناقل HIV زخمی شده اند تجویز کرد.
PCR به تشخیص زودهنگام عفونت کمک می کند، قبل از اینکه بدن آنتی بادی برای HIV تولید کند. با درصد احتمال بالا، مطالعه می تواند نتیجه را در عرض 5-14 روز پس از ورود ویروس نشان دهد. 
در موارد دیگر، وجود ویروس در بدن انسان به ایجاد یک سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA) کمک می کند. آنتی‌بادی‌های HIV را در خون فرد شناسایی می‌کند که 1 تا 3 ماه پس از عفونت شروع به تولید می‌کنند. تعیین کمی و تجزیه و تحلیل میکروارگانیسم ها برای نظارت بر درمان بیماران ضروری است.
PCR برای تشخیص هپاتیت
هپاتیت C ویروسی یک بیماری جدی است که می تواند منجر به ایجاد سیروز کبدی شود. در طول دوره نهفتگی که می تواند تا 12 ماه باشد، ویروس به هیچ وجه خود را نشان نمی دهد، بیمار عملا مسری نیست و ویروس را نمی توان با آزمایش خون معمولی تشخیص داد.
اغلب، اگر به موقع درمان نشود، بیماری مزمن می شود و عوارض متعددی را تهدید می کند.
در صورت ابتلا به هپاتیت B، دوره کمون آنقدر طولانی نیست و اولین علائم را می توان پس از 4 هفته مشاهده کرد. در این دوره است که الایزا می تواند وجود ویروس را در بدن نشان دهد.
روش PCR اجازه می دهد:
- شناسایی بیماری در مرحله رشد انکوباسیون؛
- حل تحلیل های مشکوک سایر مطالعات؛
- ارزیابی اثربخشی درمان ضد ویروسی
عدم وجود ویروس DNA هپاتیت پس از درمان نشانه اثربخشی آن است.
تست سل
ایجاد سل توسط باسیل کوخ تحریک می شود که می تواند از طریق قطرات هوا وارد بدن انسان شود. این بیماری به دو صورت پنهان و آشکار است. در حالت اول، فرد مبتلا ناقل عفونت نیست و مایکوباکتریوم موجود در خلط حتی با استفاده از PCR نیز تشخیص داده نمی شود. این فرم هنوز خطرناک است، زیرا می تواند وارد مرحله باز شود. 
مرحله باز (فعال) حتی در صورت رعایت دقیق قوانین بهداشت شخصی، برای دیگران خطر ایجاد می کند. برای تشخیص بیماری از فلوروگرافی، توموگرافی و اشعه ایکس قفسه سینه استفاده می شود. همچنین برای این منظور از تست پوستی سلی (تست Mantoux) استفاده می شود. اما موثرترین روش تحقیق PCR است.
نمونه های زیر به عنوان نمونه آزمایشی استفاده می شوند:
- خون؛
- خلط؛
- مایع برونش
PCR برای تشخیص HPV
تشخیص HPV در صورت وجود علائم بیماری مانند پاپیلوم و زگیل در ناحیه تناسلی انجام می شود. همچنین، این مطالعه در مرحله برنامه ریزی بارداری، در صورت ناباروری، سقط جنین و همچنین در شرایط عفونت یکی از شرکا تجویز می شود، زیرا یکی از مکانیسم های انتقال ویروس جنسی است.
خطرناک ترین چیز وجود ویروس در بدن نیست، بلکه نوع آن است. برخی از انواع آن (16 و 18) به شدت انکوژن هستند و می توانند باعث سرطان دهانه رحم در زنان شوند. روش PCR را می توان در ارتباط با انواع دیگر تحقیقات تجویز کرد. برای تجزیه و تحلیل، اغلب از یک اسمیر از اندام های تناسلی استفاده می شود. خون، ادرار و ترشحات واژن به ندرت به عنوان بیومواد استفاده می شود.
برای تبخال
این آزمایش عفونت دستگاه تناسلی را با ویروس هرپس سیمپلکس نوع 1 و 2 (HSV1/HSV2) تشخیص می دهد. اگر نتیجه HSV2 مثبت باشد، باید از نظر HIV و سایر بیماری های مقاربتی آزمایش شوید. تجزیه و تحلیل به خون وریدی بیمار نیاز دارد. 
در صورت وجود علائم، ادرار، ترشحات و محتویات بثورات نیز ممکن است بررسی شوند.
معاینه جامع PCR
در صورت لزوم یا به منظور پیشگیری از بیماری، ممکن است مجموعه ای از آزمایشات PCR تجویز شود. اغلب، آغازگر خود بیمار است؛ مواردی وجود دارد که یک معاینه جامع برای جلوگیری از شیوع بیماری های خاص در یک منطقه خاص تجویز می شود.
PCR-12 یک مطالعه جامع است که عفونت های زیر را پوشش می دهد:
- هپاتیت
- تبخال.
- STD
- بیماری سل.
- آنسفالیت.
- کاندیدیازیس
- عفونت هلیکوباکتر پیلوری
- سیتومگالوویروس.
- مونونوکلئوز
- انکوویروس ها
- لیستریوز
توضیح آنالیز PCR
پس از تجزیه و تحلیل با استفاده از روش PCR، می توان نتیجه مثبت یا منفی را اعلام کرد.
نتایج تشخیص PCR به این صورت است. دکتر به شما خواهد گفت که چیست و چگونه آن را رمزگشایی کنید دقت تشخیص PCR
در بیشتر موارد، تشخیص PCR نتایج بسیار دقیقی را ارائه می دهد. اما در برخی موارد، برای تایید تشخیص صحیح به روش های تحقیقاتی اضافی نیاز است.
چه چیزی می تواند باعث یک نتیجه نادرست شود؟
نتایج مثبت کاذب می تواند ناشی از عدم رعایت قوانین جمع آوری تجزیه و تحلیل و انجام خود فرآیند تحقیق باشد.
در صورت عدم آمادگی کافی برای تحویل بیومتریال، خود بیمار ممکن است مقصر اطلاعات نادرست باشد. تجهیزات آزمایشگاه و حرفه ای بودن پزشک می تواند به طور مستقیم بر نتایج مطالعه تأثیر بگذارد.
از کجا می توان تشخیص PCR را دریافت کرد
تشخیص PCR در کلینیک ها و آزمایشگاه های خصوصی به دستور پزشک یا به ابتکار خود بیمار به منظور پیشگیری انجام می شود. 
اولویت باید به کلینیک ها و آزمایشگاه هایی با تجهیزات مدرن داده شود که چندین سال است در بازار پزشکی حضور دارند و خود را ثابت کرده اند.
تجزیه و تحلیل PCR: هزینه و زمان
این روش تشخیصی گران است. قیمت آن از 200 تا 500 روبل برای هر نوع متغیر است. یک معاینه جامع برای وجود چندین عفونت می تواند در مقایسه با پرداخت هزینه برای هر معاینه به طور قابل توجهی صرفه جویی کند.
مدت زمان مطالعه بستگی به نوع عفونت دارد و می تواند از 1 تا 5 روز طول بکشد. همچنین این شاخص ها به تجهیزات آزمایشگاه و صلاحیت کارمند پزشکی بستگی دارد.
تشخیص PCR (آنچه که در این مقاله به تفصیل توضیح داده شده است) دقیق ترین و سریع ترین روش تحقیق است. این یکی از مهمترین اکتشافات قرن بیستم است. در پزشکی
به لطف این روش، درمان کامل بسیاری از بیماری ها امکان پذیر شد. اما نباید فراموش کرد که PCR معایبی نیز دارد و گاهی اوقات اثربخشی آن همراه با استفاده از روش‌های تحقیقاتی دیگر افزایش می‌یابد.
قالب مقاله: ولادیمیر کبیر
ویدئویی در مورد تشخیص PCR
در مورد دقت PCR:
تست PCR حساس ترین و دقیق ترین روشی است که برای تشخیص عفونت های مقاربتی استفاده می شود. این نه تنها برای بیماری های مقاربتی، بلکه برای ارزیابی میکرو فلور فرصت طلب واژن، روده و سیستم تنفسی نیز استفاده می شود. زمان انجام PCR برای عفونت های مختلف متفاوت است و به نوع آنالیز بستگی دارد: کیفی یا کمی.
چه مدت طول می کشد تا یک آزمایش PCR آماده شود، البته برای بیماران مبتلا به بیماری های مقاربتی یا مشکوک به داشتن آنها، بیشترین نگرانی را دارد. زیرا بسیار مهم است که درمان به موقع شروع شود و عزیزان مبتلا نشوند.
برای اکثر عفونت‌های مقاربتی، زمان انجام آنالیز PCR با کیفیت بالا، که وجود یک عفونت خاص را مشخص می‌کند، 1 روز است. در عرض یک روز می توانید کلامیدیا، مایکوپلاسما، اورهاپلاسما، گاردنرلا، تریکوموناس، سوزاک، تبخال، سیتومگالوویروس، HPV، کاندیدا و بسیاری از انواع دیگر میکروارگانیسم ها را که باعث بیماری های مقاربتی می شوند، شناسایی کنید. مواد برای تحقیق معمولاً عبارتند از:
- خراشیدن از مجرای ادرار، آلت تناسلی یا واژن.
- خراشیدن از غشای مخاطی اوروفارنکس، ملتحمه، رکتوم.
- خراشیدن از فرسایش و زخم.
- ادرار
- ترشح پروستات، اسپرم.
- خلط، بزاق.
انجام آزمایش های کمی PCR کمی بیشتر طول می کشد، که نه تنها عامل بیماری زا، بلکه مقدار آن را روی غشای مخاطی یا مایع بیولوژیکی نیز تعیین می کند. دوره چنین تجزیه و تحلیل PCR 2-3 روز است.
تشخیص DNA STI ها نه تنها با کمک خراش دادن انجام می شود. برای تعدادی از عفونت ها خون گرفته شده و وجود ویروس در 1 میلی لیتر مشخص می شود. چنین مطالعاتی هنگام بررسی HIV، هپاتیت، CMV، ویروس های هرپس و توکسوپلاسموز ضروری است.
چند روز انجام PCR برای HIV کمتر از تشخیص STD های باکتریایی نگران کننده نیست. واقعیت این است که این تجزیه و تحلیل اولیه ترین آزمایش برای ایدز/HIV است و حضور RNA ویروس نقص ایمنی را در زمانی که سایر آزمایش ها هنوز پاسخ نداده اند نشان می دهد.
آزمایش خون کیفی PCR برای HIV، هپاتیت و سایر عفونت ها معمولاً در عرض 3 روز انجام می شود. مقدار کمی می تواند 5-7، گاهی اوقات تا 14 طول بکشد.
اینکه چقدر آزمایش PCR آماده می شود نه تنها به نوع ویروس یا باکتری شناسایی شده، بلکه به آزمایشگاهی که آن را انجام می دهد نیز بستگی دارد. در کلینیک های ما، مواد آزمایش به طور مستقیم ظرف چند ساعت به آزمایشگاه تحویل داده می شود. بنابراین، زمان مورد نیاز برای Real-time PCR حداقل است و دقت مطالعه 99-100٪ است. آزمایش‌های بیماران ما فقط در آن دسته از آزمایشگاه‌های تشخیص بالینی انجام می‌شود که خود را به بهترین شکل در انجام آنالیز PCR ثابت کرده‌اند.
به دلیل فناوری آن، آنالیز PCR نمی تواند سریعتر از آنچه در این مقاله توضیح داده شده است انجام شود، زیرا رشد زنجیره های DNA یا RNA زمان می برد.
