PCR در تشخیص عفونت HIV. اصول استفاده از تشخیص PCR برای عفونت HIV HIV با PCR قابل تشخیص نیست

برای اکثر زنان و مردان، این بیماری مقاربتی بزرگترین نگرانی است. به همین دلیل، پس از یک رابطه صمیمی گاه به گاه بدون جلوگیری از بارداری مانع، و همچنین با تغییر مکرر شریک جنسی و پس از عمل جراحی، یک فرد منطقی احتیاط خاصی را تجربه می کند. مطمئن ترین راه برای روشن شدن این موضوع مراجعه به کلینیک و انجام آزمایش PCR برای HIV است.

برای تعیین شاخص های زیر می توان از آزمایش خون استفاده کرد:

• رد/تأیید وجود HIV در دوره نهفته (در هفته های اول پس از عفونت، آنتی بادی ها به دلیل عدم وجود یا غلظت بسیار کم در آزمایشات الایزا شناسایی نمی شوند).
• تعیین ژنوتیپ HIV-1، HIV-2.
• شناسایی وضعیت کودکان متولد شده از مادران ناقل (آنتی بادی های HIV برای مدت طولانی در تمام کودکان متولد شده از زنان آلوده به HIV شناسایی شده است. توصیه می شود DNA ویروس در کودکان زیر 48 ساعت 1 تعیین شود. -2 ماه، 3-6 ماه).
• نتایج منفی کاذب، مثبت کاذب و مشکوک تست های الایزا.
• تشخیص میزان HIV و نظارت بر تغییرات بار ویروسی در طول زمان (در صورت تشخیص از قبل ایجاد شده ایدز، تجزیه و تحلیل PCR برای پیش آگهی، مشاهده پویا و نظارت بر درمان استفاده می شود).

قیمت آزمایش PCR برای HIV

مواد و روش ها	نوع آنالیز PCR	قیمت
DNA نوع 1 HIV	کیفی	2 750
HIV نوع 1 RNA در پلاسما	کمی	8 850
HIV RNA، تعیین مقاومت HIV به مهارکننده‌های پروتئاز و ترانس کریپتاز معکوس (به همراه «HIV RNA در پلاسما»)	-	16 550
HIV RNA، تعیین مقاومت HIV به مهارکننده‌های اینتگراز (به همراه "HIV RNA در پلاسما")	-	16 950
HIV-1 RNA/DNA، تعیین تروپیسم HIV	-	16 950
تحقیقات چند مرحله ای
RNA هپاتیت C + DNA هپاتیت B + RNA HIV نوع 1 و 2 (روش فوق حساس)	کیفی	3 800

تجزیه و تحلیل PCR برای HIV - چه زمانی انجام می شود، چرا و در چه زمانی؟

1. DNA HIV.تشخیص DNA ویروس نقص ایمنی انسانی می تواند برای تشخیص زودهنگام عفونت احتمالی پس از یک مورد پرخطر استفاده شود (آزمایش خون 10 روز پس از عفونت احتمالی شروع می شود). با این حال، برای حذف کامل عفونت، لازم است متعاقباً یک مطالعه تکراری و تشخیص ELISA طی 4 و 12 هفته انجام شود.
   نتایج تجزیه و تحلیل: HIV DNA (تحلیل کیفی)- "تشخیص نشد" یا "تشخیص داده شد". در مورد دوم، مطالعات اضافی مکرر برای تایید عفونت HIV مورد نیاز است. اگر نتیجه منفی باشد، اما خطر عفونت زیاد باشد، معاینه مجدد لازم است - اهدای خون با استفاده از روش PCR یا ELISA پس از مدتی.
2. HIV RNAتعیین RNA HIV توسط PCR کمی (به اصطلاح "بار ویروسی") یکی از شاخص های ارزیابی پیش آگهی دوره عفونت HIV و اولین شاخص اثربخشی درمان ضد ویروسی است. این آزمایش برای نظارت بر روند بیماری، تصمیم گیری در مورد شروع درمان و ارزیابی اثربخشی آن توصیه می شود.
   آزمایش RNA HIV توسط PCR می تواند در بزرگسالان برای تشخیص زودهنگام قابل اعتماد عفونت احتمالی پس از یک دوره پرخطر (تقریبا 7-10 روز پس از عفونت احتمالی) استفاده شود. وجود تیتر بالای HIV RNA در غیاب آنتی بادی ها امکان تشخیص عفونت حاد HIV را فراهم می کند. با این حال، برای روشن شدن تشخیص، انجام یک مطالعه تکراری و تشخیص ELISA در طی 1 و 3 ماه ضروری است.
   آزمایش HIV RNA PCR در زنان باردار مبتلا به این عفونت 3-4 هفته قبل از موعد مورد انتظار برای تصمیم گیری در مورد روش زایمان (واژینال یا سزارین) اندیکاسیون دارد.
   نتایج تجزیه و تحلیل: HIV RNA HIV نوع 1 (تحلیل کمی)- "تشخیص داده نشد" (این طبیعی است).
3. مقاومت HIVتجزیه و تحلیل برای تعیین مقاومت HIV در برابر پروتئاز و مهارکننده‌های ترانس کریپتاز معکوس برای افراد مبتلا به HIV با درمان ناکارآمد و همچنین در طول دوره عفونت حاد قبل از شروع درمان ضد ویروسی نشان داده شده است. این مطالعه به ما امکان می دهد مقاومت HIV در برابر داروها را تعیین کنیم. بر اساس نتایج تجزیه و تحلیل، متخصص بیماری های عفونی در مورد وجود جهش های مقاومت به مهارکننده های پروتئاز، مهارکننده های نوکلئوزیدی و غیر نوکلئوزیدی رونوشت معکوس، و همچنین اطلاعاتی در مورد هر موقعیت اسید آمینه مرتبط با جهش مقاومت دارویی می آموزد.
4. تشخیص جامع Multiprime:تعیین کیفی RNA ویروس هپاتیت C / DNA ویروس هپاتیت B / ویروس نقص ایمنی انسانی (HIV) RNA نوع 1 و 2 (روش فوق حساس). این تجزیه و تحلیل امکان تشخیص زودهنگام عفونت HIV، هپاتیت ویروسی C و B را فراهم می کند. این مطالعه برای تشخیص زودهنگام هپاتیت ویروسی B و C، HIV نوع 1/2 در افراد در معرض خطر نشان داده شده است. شناسایی ویروس های DNA یا RNA نشان دهنده عفونت است.

زمان برگشت داده های آزمایش خون از 3 تا 7 روز تقویمی است. برای تشخیص عفونت HIV در مسکو می توانید یک آزمایش PCR کیفی و کمی را در مرکز پزشکی ما انجام دهید. خونگیری روزانه، از ساعت 10 تا 00، از جمله در

یکی از جدی ترین بیماری ها که هنوز درمان نشده است، ویروس نقص ایمنی انسانی است.

تشخیص پاتوژن در بدن آسان نیست: در حال حاضر تنها چند روش تحقیق برای این مورد استفاده می شود.

یکی از این تست ها این است واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR).

برای درک روش واکنش زنجیره ای پلیمراز، باید ویژگی های ساختاری سلول ها را از مدرسه به خاطر بسپارید.

هر سلول زنده حاوی پروتئین و دو نوع اسید نوکلئیک است: DNA و RNA. آنها مهمترین ساختارهای سلولی هستند زیرا حاوی اطلاعات ژنتیکی هستند که به روش خاصی رمزگذاری شده اند.

کد DNA یک توالی دقیق از ریزساختارها است که یک زنجیره طولانی را تشکیل می دهد.

ارجاع!اساس PCR توانایی نوکلئیک اسید برای تولید مثل مستقل است.

هنگامی که ویروس وارد سلول های سالم می شود، رشته های DNA را از بین می برد.

در این مورد، سلول دیگر شامل زنجیره های کامل نخواهد بود، بلکه فقط قطعات کوچک - نوکلئوتیدها را شامل می شود. علاوه بر این، حتی کوچکترین ذرات ویروس نیز قابل مشاهده خواهد بود.

روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بر اساس تشخیص رشته های DNA آسیب دیده و سلول های باقی مانده است.

دو نوع تشخیص PCR وجود دارد:

• کیفیت بالا. مناسب برای کسانی که تشخیص آنها تایید نشده است: به سادگی نشان می دهد که آیا ویروس در سلول ها وجود دارد یا خیر.
• کمی. بیمار نتیجه «دی‌ان‌ای ویروسی شناسایی نشده» را دریافت می‌کند، که به معنای عدم وجود HIV یا اطلاعاتی در مورد وجود عامل بیماری‌زا است، به این معنی که فرد مبتلا به HIV است.

اگر تشخیص تایید شده در دسترس باشد، تجزیه و تحلیل کمی تجویز می شود. برای تعیین تعداد نسخه های RNA (DNA) ویروس در خون (سلول ها) استفاده می شود. تجزیه و تحلیل کمی به ما امکان می دهد اثربخشی درمان را در افراد آلوده به HIV ارزیابی کنیم، شدت بیماری و پیشرفت آن را تعیین کنیم.

چه روش های تشخیصی می تواند عفونت HIV را تشخیص دهد در این ویدئو توضیح داده شده است:

مزایا و معایب این روش تشخیصی

مانند هر روش تشخیصی، PCR نیز مزایا و معایب خود را دارد.

مزایای روش عبارتند از:

• قابلیت اطمینان بالا.با PCR، می توان کوچکترین بقایای ویروس را شناسایی کرد؛ احتمال تشخیص پاتوژن 4-5 روز پس از عفونت به 80٪ و 14 روز پس از عفونت به 100٪ می رسد. بنابراین، بیشترین دقت هنگام مطالعه DNA ویروس در سلول های خونی به دست می آید: زمانی که تعداد آن 1-5 کپی در هر 1 میلیون سلول باشد، ویروس را می توان تشخیص داد.
• امکان استفاده از بیومواد مختلف(بزاق، ادرار، عرق و اشک برای PCR مناسب نیستند، اما می توان از خون، مایع منی و ترشحات تناسلی زنان استفاده کرد).
• امکان آنالیز بیماری های مختلف با استفاده از یک نمونه.با استفاده از PCR می توانید HIV، کلامیدیا، تبخال، سیتومگالوویروس، اورهاپلاسما، مایکوپلاسما، سوزاک، تریکومونازیس، توکسوپلاسموز را تشخیص دهید.
• سرعت بالا در به دست آوردن نتایج.یک آزمایش سریع PCR وجود دارد که به شما امکان می دهد در عرض چند ساعت به نتایج تشخیصی پی ببرید.
• حساسیت بالا PCR، بر خلاف، به عنوان مثال، ELISA، به شناسایی ویروس در هفته های اول پس از عفونت کمک می کند.
• امکان حصول نتیجه در عرض چند روز پس از عفونت.در صورت آلوده شدن، ویروس را می توان بعد از 5-14 روز تعیین کرد، در حالی که توصیه می شود ELISA فقط پس از 6 هفته انجام شود.
• بدون محدودیت سنی PCR را می توان هم در بزرگسالان و هم در کودکان از لحظه تولد انجام داد.

ویژگی اصلی آنالیز PCR این است که آنتی بادی های ویروس را تشخیص نمی دهد، بلکه خود ویروس را تشخیص می دهد.

تنها چند معایب در برابر مزایا وجود دارد:

• گران.
• احتمال به دست آوردن نتایج مثبت کاذب حدود 20 درصد است. این معمولاً به دلیل تقصیر پرسنل اتفاق می افتد (خطا در هنگام جمع آوری یا حمل و نقل بیومواد، هنگام مطالعه مواد زیستی و رمزگشایی نتایج).
• نیاز به استفاده از تجهیزات پیشرفته با تکنولوژی بالا که فقط برخی از کلینیک ها به آن مجهز هستند.

توجه!بدیهی است که این روش مزایای بسیار بیشتری نسبت به معایب دارد. به ویژه مهم است که با استفاده از PCR می توان بیماری را در مرحله اولیه توسعه شناسایی کرد و درمان را به موقع آغاز کرد.

نتیجه آزمایش PCR می تواند 14-21 روز پس از عفونت احتمالی مثبت باشد. اما اگر آزمایش منفی باشد، این عدم وجود عفونت را تضمین نمی کند. بهتر است بعد از 2 هفته آزمایش الایزای تاییدی عسل انجام شود.

نحوه انجام آزمایش PCR برای HIV در ویدیو توضیح داده شده است:

به چه کسی اختصاص دارد؟

اول از همه، در صورت مشکوک بودن به HIV، PCR تجویز می شود. این تکنیک همچنین می تواند برای شناسایی بیماری های مقاربتی و بیماری های ارثی نشان دهنده باشد.

ارجاع!تشخیص PCR اغلب به ابتکار فردی انجام می شود که علائم بیماری را نشان نداده است، اما یک فرضیه و نگرانی در مورد عفونت احتمالی وجود دارد، به عنوان مثال، پس از آمیزش جنسی محافظت نشده، تزریق خون اخیر، یا تماس با فرد آلوده. شخص

چه کسی دیگری برای معاینه نشان داده شده است؟

• افرادی که تست الایزا دو بار مثبت بوده است. PCR امکان تشخیص قطعی را فراهم می کند.
• اهداکنندگانی که قصد اهدای خون دارند.
• افرادی که ایمونوبلات تشخیص را برای آنها تایید کرد. ایمون بلات روشی برای تشخیص ایدز است و معمولاً همراه با PCR انجام می شود.
• افرادی که تحت درمان بیماری های ناشی از HIV هستند. PCR به شما امکان می دهد اثربخشی درمان را ارزیابی کنید.
• نوزادانی که مادرشان HIV مثبت است (انتقال ویروس تقریباً در 30٪ موارد رخ می دهد). در حال حاضر 2-3 هفته پس از تولد، می توان تشخیص داد که آیا عفونت رخ داده است یا خیر.

برخی از افراد برای اهداف پیشگیرانه آزمایش می شوند، اما این اغلب اتفاق نمی افتد زیرا هزینه آزمایش PCR بالا است.

تجزیه و تحلیل چقدر طول می کشد و کجا می توانم آن را انجام دهم؟

آنالیز HIV PCR در یک محیط آزمایشگاهی انجام می شود.

خون گیری خود 5-10 دقیقه طول می کشد و نتایج روز بعد آماده است.

هنگام انتخاب تشخیص سریع (به عنوان مثال، در آزمایشگاه های Invitro یا Hemotest)، تفسیر نتایج توسط متخصص تنها 2 ساعت طول می کشد.

در کلینیک های خصوصی، در صورت تمایل می توان تشخیص را به صورت ناشناس انجام داد. برای انجام این کار، باید در طی یک ویزیت شخصی در این مورد اطلاع دهید: به هر بیمار یک شماره سریال اختصاص داده می شود و به یک حساب شخصی دسترسی پیدا می کند. سپس فرد حتی بدون مراجعه مجدد به آزمایشگاه می تواند نتایج را دریابد.

قابلیت اطمینان نتایج آزمایش PCR در ویدیو توضیح داده شده است:

هزینه مطالعه

تشخیص PCR ارزان نیست، زیرا به تجهیزات پیشرفته خاصی و همچنین دانش ویژه متخصص نیاز دارد.

این تجهیزات فقط در برخی از آزمایشگاه های پزشکی موجود است که باعث می شود آنالیز گران باشد.

میانگین هزینه تحقیق 3000-5000 روبل است. در برخی مناطق هزینه از 1500-2000 روبل تجاوز نمی کند.

از آنجایی که احتمال نتایج مثبت کاذب و منفی کاذب وجود دارد یا فرد خیلی زود درخواست را مطرح کرده است (ویروس هنوز به ساختار DNA آسیب ندیده است، اما در حال حاضر در بدن وجود دارد)، ممکن است نیاز به تکرار آزمایش باشد.

هزینه بالا همچنین به این دلیل است که تشخیص به تعدادی مؤلفه نیاز دارد:

1. یک قطعه DNA (الگو) در نظر گرفته شده برای تقویت؛
2. دو پرایمر؛
3. پلیمراز یک جزء فعال شیمیایی است که افزایش تعداد ذرات ویروسی را به صورت تصاعدی تسریع می کند.
4. تری فسفات های دئوکسی ریبونوکلئوزید؛
5. ذرات باردار منیزیم دو ظرفیتی؛
6. یک محلول ویژه که در آن فرآیند پلیمریزاسیون انجام می شود. این محلول برای حفظ سطح مناسب اسیدیته، غلظت نمک و مقدار منیزیم موجود در مایع طراحی شده است.

همچنین، این مطالعه به مقدار کمی وازلین نیاز دارد: حاوی چربی و جوش در دمای بالا است که از نمونه مورد مطالعه در برابر گرم شدن بیش از حد محافظت می کند.

انجام تحلیل

خون، مایع منی و ترشحات واژن برای آنالیز مناسب هستند. معمولا، خون وریدی بیشتر مورد استفاده قرار می گیرد.

خون گیری در صبح با معده خالی انجام می شود.

علاوه بر این، شما باید برای تجزیه و تحلیل آماده شوید:

• 2-3 روز قبل از تشخیص، غذاهای چرب باید از رژیم غذایی حذف شوند.
• الکل 1-2 روز قبل از تجزیه و تحلیل حذف می شود.
• 2 هفته قبل از آزمایش باید مصرف داروهای محرک سیستم ایمنی را قطع کنید.
• آخرین وعده غذایی باید حداکثر 8 ساعت قبل از اهدای خون انجام شود.

هنگام گرفتن خون از ورید، خم داخلی آرنج با محلول خاصی درمان می شود، پس از آن متخصص پوست را سوراخ می کند، سوزن سرنگ ورید را قرار می دهد و مقدار مورد نیاز خون را می گیرد. سپس سوزن برداشته می شود، ناحیه مورد نظر دوباره با الکل درمان می شود و به بیمار یک سواب پنبه داده می شود.

بیمار باید به طور موقت دست خود را خم کند تا خونریزی متوقف شود. اگر فردی احساس خوبی داشته باشد، می تواند بلافاصله به خانه برود. برای سرگیجه، حالت تهوع و غش، کمک های اولیه ارائه می شود.

تکنسین آزمایشگاه ماده زیستی حاصل را در یک فلاسک استریل قرار می دهد و آن را برای تشخیص می فرستد. متخصص مواد بیولوژیکی تقسیم شده را در یک راکتور ویژه با آنزیم هایی که عفونت های مختلف را سنتز می کنند مخلوط می کند.

اگر ذرات ویروس بسیار کمی در خون وجود داشته باشد، هنگام تعامل با آنزیم ها، تعداد آنها به شدت افزایش می یابد: معرف ها با DNA ویروس ترکیب می شوند و آن را تکرار می کنند.

تجزیه و تحلیل در چندین مرحله انجام می شود، زیرا تقسیم مولکول ها در پیشرفت هندسی اتفاق می افتد. یک سلول 2 می کند، 2 می شود 4 و غیره.

با تجزیه و تحلیل نظرات و بررسی های پزشکان، می توان با اطمینان گفت: در حال حاضر، تشخیص PCR دقیق ترین روش برای آزمایش عفونت HIV است.

ارجاع!با استفاده از تجزیه و تحلیل، می توان وجود ویروس را در بدن طی چند روز پس از عفونت تعیین کرد، حتی اگر تعداد ساختارهای ویروسی تنها 1-5 واحد در هر میلیون سلول باشد. با این حال، ما نباید در مورد معایب روش، به عنوان مثال، احتمال به دست آوردن نتایج مثبت کاذب را فراموش کنیم.

با این حال، PCR یکی از معدود آزمایشاتی است که امکان تشخیص به موقع بیماری و شروع درمان را فراهم می کند.

تکنیک تشخیصی PCR در ابتدا 35 سال پیش توسط دانشمند آمریکایی Kari Mullis توسعه یافت. مخترع این مطالعه جایزه بین المللی نوبل را در سال 1993 برای نوآوری خود دریافت کرد. برای هر فعالیت آزمایشگاهی ضروری شده است.

PCR در زیست شناسی مولکولی برای ساختن کپی های زیادی (تقویت) بخش های کوچک DNA استفاده می شود. DNA پلیمراز فقط می تواند یک نوکلئوتید را به یک گروه 3-OH از قبل موجود اضافه کند. بنابراین او به یک آغازگر نیاز دارد که بتواند اولین نوکلئوتید را به آن اضافه کند. این نیاز به شما امکان می دهد بخش خاصی از توالی الگو را که نیاز به تشخیص دارد شناسایی کنید. در پایان واکنش PCR، یک توالی خاص به میلیاردها نسخه (آمپلیکون) انباشته می شود.

PCR شامل یک فرآیند گرمایش و سرمایش به نام سیکل حرارتی است که توسط تجهیزات تخصصی انجام می شود. واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) یک تکنیک نسبتا ساده است. این الگوی DNA را برای تولید قطعات خاص DNA در شرایط آزمایشگاهی (تحلیل در شرایط آزمایشگاهی) تقویت می کند. روش‌های سنتی شبیه‌سازی یک توالی DNA در یک ناقل و تکثیر آن در یک سلول زنده اغلب به چندین روز تا چند هفته تحقیق نیاز دارند. اما پس از چند ساعت می‌توانید نتایج تکثیر توالی DNA را با استفاده از PCR دریافت کنید.

اکثر آزمایش‌های بیوشیمیایی که در تشخیص بیماری‌های عفونی استفاده می‌شوند، به مقدار نسبتاً زیادی مواد بیولوژیکی نیاز دارند. برای PCR این شرط اجباری نیست. بنابراین، PCR ممکن است تشخیص پاتوژن حساس تری را فراهم کند. و سطوح بالاتر تقویت توالی های خاص در زمان کمتر با مقدار نسبتاً محدودی از مواد زیستی. این ویژگی ها این فناوری را بسیار مفید می کند. نه تنها برای تحقیقات پایه، بلکه برای اهداف شخصی. از جمله تست هویت ژنتیکی، تست پزشکی قانونی، کنترل کیفیت صنعتی.

ارزش اصلی تجزیه و تحلیل در توانایی شناسایی آسیب شناسی های مقاربتی قبل از ایجاد اولین علائم نهفته است. زمانی که تشخیص زودهنگام عفونت HIV ضروری باشد از آنالیز PCR استفاده می شود. و همچنین تعیین RNA ویروس در خون اهدا کننده. با توجه به حساسیت بالای تجزیه و تحلیل، می توان 7-14 روز پس از عفونت مشکوک به آن پاسخ داد. قابلیت اطمینان تشخیصی از 85 تا 98 درصد خواهد رسید. با این حال، آزمایش PCR برای همه تجویز نمی شود. زیرا مطالعه نسبتاً گرانی است. مهمتر از همه، نیاز به تجهیزات گران قیمت و مهارت های حرفه ای خاصی از کارکنان آزمایشگاه دارد. اگر بیمار قبلاً در موقعیت های مرتبط با افزایش خطر عفونت نبوده است، واکنش پلیمراز توصیه نمی شود.

واکنش کیفی پلیمراز برای HIV

انجام PCR با کیفیت بالا برای HIV به شما امکان می دهد وجود یک بیماری ویروسی را در بدن تعیین کنید. بیمار می تواند نتیجه را به صورت علائم زیر دریافت کند: مثبت، مثبت کاذب، منفی. اما این مطالعه امکان تعیین تعداد نسخه های رتروویروس را فراهم نمی کند. تجزیه و تحلیل کیفی در بیمارانی که قبلاً عفونت تشخیص داده شده است انجام نمی شود. برای نظارت بر اثربخشی درمان ضد ویروسی تجویز نمی شود.

PCR کمی برای HIV

این برای تعیین نسخه هایی از ویروس RNA در مواد بیولوژیکی بیمار انجام می شود. PCR کمی تنها برای بیماران مبتلا به عفونت شناسایی شده قبلی، به عنوان نظارت بر درمان مداوم تجویز می شود.

Real-time PCR

در تشخیص های آزمایشگاهی برای ایجاد کپی از بخش های DNA استفاده می شود. همچنین برای تحقیقات کمی و همزمان تشخیص توالی DNA در بیومتریال. اساساً تشخیص PCR کمی است.

در یک یادداشت!

در آزمایشگاه های مختلف می توانید چندین فرمول تشخیصی پیدا کنید: "تعیین کمی PCR" و "PCR بلادرنگ".

هر دو تحلیل یکسان هستند.

گرفتن مواد برای تشخیص HIV

جمع آوری مواد بیولوژیکی برای تشخیص HIV با استفاده از PCR طبق استانداردهای خاصی انجام می شود. دستکاری در اتاق درمان انجام می شود. از ابزار استریل یکبار مصرف استفاده می شود. بسته با ابزار مستقیماً در نزدیکی بیمار باز می شود. مواد جمع‌آوری‌شده در لوله‌های استریل که از قبل با CrO3 (مخلوط کروم) تیمار شده‌اند قرار داده می‌شوند. ماده بیولوژیکی خون وریدی است که صبح و با معده خالی اهدا می شود. چند روز قبل از انجام آزمایش، باید از نوشیدن الکل، غذاهای چرب و تند خودداری کنید و مصرف داروها را قطع کنید.

اگر امکان قطع دارو وجود ندارد، باید قبل از آزمایش گزارش شود.

علاوه بر این، ممکن است یک اسمیر از مجرای ادرار و واژن برای شناسایی بیماری های مقاربتی همزمان گرفته شود. مطالعه به صورت ناشناس انجام می شود و بیمار نتایج را شخصا دریافت می کند. توصیه می شود شناسنامه خود را همراه داشته باشید.

چه مدت بعد می توانید آزمایش PCR برای HIV انجام دهید؟

پس از آن می توان وجود ویروس HIV را تشخیص داد 4-6 روز پس از عفونت در این صورت محتوای اطلاعاتی تحلیل به 85 درصد خواهد رسید. پس از 10-13 روز، تجزیه و تحلیل می تواند بیماری را با دقت 98٪ تعیین کند. نتیجه منفی تنها در صورتی صادق است که زودتر از 2 هفته پس از عفونت مشکوک مصرف نشود.

دلایل نتیجه مثبت کاذب

گرفتن نتیجه مثبت کاذب بسیار دشوار است.

این امر در صورت عدم رعایت قوانین جمع آوری مواد بیولوژیکی، برچسب نادرست لوله ها، استفاده از سیستم تست با کیفیت پایین و سایر عوامل مشابه امکان پذیر است. در سایر موارد، شانس به دست آوردن نتیجه مشابه بیش از 2٪ نیست.

چه مدت طول می کشد تا نتایج آزمایش به دست آید؟

از نقطه نظر فنی، نتایج PCR را می توان در عرض 4 ساعت به دست آورد. اما در عمل، بیمار از یک تا چند روز گزارش آزمایشگاهی دریافت می کند. به طور کلی زمان بندی بستگی به حجم کاری آزمایشگاه و سازماندهی کار آن دارد.

انجام واکنش پلیمراز در نوزاد تازه متولد شده

PCR زمانی تجویز می شود که کودک از مادر HIV مثبت متولد شود. انجام ELISA در این مورد آموزنده نیست. از آنجایی که کودک تا حدود 2 سالگی آنتی بادی های ضد رتروویروس را حفظ می کند. به همین دلیل، ایمونواسی آنزیمی پاسخ دقیقی نخواهد داد. اگر آزمایش PCR روی کودک 6-4 هفتگی انجام شود و نتیجه مثبت حاصل شود، در مورد عفونت صحبت خواهیم کرد.

اگر PCR انجام شده بین 8 هفته تا 6 ماهگی نتایج منفی نشان دهد (به شرطی که کودک از شیر مادر تغذیه نکرده باشد)، عفونت منتفی است.

چرا PCR برای تشخیص HIV بهتر از الایزا است؟

واکنش پلیمراز تشخیص RNA ویروس و حضور آن در بدن، از جمله موارد کمی را ممکن می سازد. وظیفه ELISA تعیین آنتی بادی برای عفونت HIV است. سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم در تعیین عفونت احتمالی کمتر از PCR نیست، دقت آن به 99٪ می رسد. با این حال، برخلاف PCR، قادر به تشخیص بیماری در مراحل اولیه توسعه آن نیست.

مزایای HIV PCR

• واکنش پلیمراز به طور مستقیم وجود یک عامل عفونی را تعیین می کند. به عنوان مثال، ELISA می تواند به طور انحصاری آنتی بادی ها و مواد زائد یک میکروارگانیسم را شناسایی کند.
• این آزمایش به وضوح یک پاتوژن خاص را شناسایی می کند، حتی اگر چندین پاتوژن با واکنش متقابل وجود داشته باشد.
• این تکنیک به شما امکان می دهد هر نوع ماده بیولوژیکی، از جمله قطرات خشک شده خون را بررسی کنید.

یکی از معایب PCR افزایش حساسیت آنالیز است. این گاهی اوقات باعث یک نتیجه مثبت کاذب می شود. اگر حتی مقدار کمی DNA خارجی در یک لوله آزمایش یا روی ابزار وجود داشته باشد، این اتفاق می افتد.

تشخیص HIV با استفاده از PCR و ELISA: تفسیر، قابلیت اطمینان نتایج

ایمونواسی آنزیمی که در آن نتایج آزمایش نشان دهنده عدم وجود آنتی بادی علیه HIV و آنتی ژن p24 در بدن است، منفی است. در صورت وجود این مولکول ها، نتیجه تشخیصی مثبت صادر می شود. در برخی موارد، بیمار ممکن است نتیجه مثبت یا منفی کاذب دریافت کند. این عواقب اوایل بارداری، وجود عفونت تبخال، نمونه برداری نادرست از مواد و اختلال در حمل و نقل لوله های آزمایش است. علاوه بر این، نتایج مشابهی در بیماران مبتلا به بیماری های خودایمنی مداوم و انواع مختلف هپاتیت یافت می شود. وسترن بلات (بلات ایمنی)، که ترکیبی از ELISA و جداسازی پروتئین ویروسی است، می تواند انجام شود.

سپس یک نتیجه مثبت در حضور عفونت ویروسی گلیکوپروتئین gp160 خواهد بود. این یک پیش ساز برای گلیکوپروتئین های پوششی HIV gp41 و gp120 است. در صورت عدم وجود این مولکول ها، نتیجه آزمایش آزمایشگاهی منفی تلقی می شود. انجام وسترن بلات در ترکیب با ELISA به شما امکان می دهد نتایجی را بدست آورید که قابلیت اطمینان آنها از 98٪ فراتر می رود. در مواردی که الایزا مثبت و وسترن بلات منفی باشد، آزمایش مشکوک تلقی می شود و نیاز به PCR دارد.

روشی برای درمان بیماری ناشی از ویروس نقص ایمنی انسانی هنوز یافت نشده است. اما تشخیص به موفقیت های جدی دست یافته است. آزمایش HIV که با استفاده از روش PCR انجام می شود یکی از گزینه های تشخیص ویروس در بدن است.

واکنش زنجیره ای پلیمراز یا PCR یکی از روش های مدرن برای تشخیص HIV است. این بر اساس توانایی اسیدهای نوکلئیک برای تولید مثل است. سلول هر موجود زنده شامل پروتئین و اسیدهای نوکلئیک است:

• RNA - اسید ریبونوکلئیک،
• DNA - اسید دئوکسی ریبونوکلئیک.

این ماکرومولکول ها کد ژنتیکی را ذخیره می کنند. اگر غلظت سلول های ویروسی در خون کم باشد، نمونه شامل کل زنجیره های DNA نیست، بلکه حاوی "بلوک های سازنده" فردی آنها - نوکلئوتیدها است. واکنش زنجیره‌ای پلیمراز حتی چنین «قطعه‌هایی» از سلول‌های ویروسی را تشخیص می‌دهد. این به شما این امکان را می دهد که زودتر پس از عفونت احتمالی، زمانی که اولین علائم بالینی ظاهر نشده اند، به نتایج برسید.

دقیق ترین نتیجه را می توان با استفاده از خون وریدی برای تجزیه و تحلیل به دست آورد. چند روز قبل از انجام معاینه 2 هفته قبل مصرف داروهای محرک سیستم ایمنی را قطع کنید.

یک نمونه زیست ماده در یک راکتور آزمایشگاهی پزشکی هضم می شود. سپس بخش ها با آنزیم ها درمان می شوند. معرف ها با DNA مولکول ویروس ترکیب شده و آن را تکثیر می کنند. از یک سلول، 2، از 2 - 4، سپس 8 دریافت می کنید. تعداد به صورت تصاعدی رشد می کند. واکنش زنجیره ای به شما این امکان را می دهد که به سرعت مقدار جزء ویروسی را افزایش دهید و آن را برای تکنسین های آزمایشگاهی قابل مشاهده کنید.

هنجار یک نتیجه آزمایش منفی است، که به نظر می رسد: "هیچ DNA ویروسی شناسایی نشده است." این مقدار مرجع (میانگین آماری) است.

مزایا و معایب روش PCR برای HIV

تشخیص HIV با استفاده از PCR مزایای غیرقابل انکاری دارد، اما معایب قابل توجهی نیز دارد. اولی شامل:

• دقت بالا. احتمال دریافت نتایج منفی کاذب بسیار کم است.
• تطبیق پذیری. نه تنها خون برای تحقیق مناسب است، بلکه سایر مایعات بیولوژیکی (ترشحات واژن، مایع منی) نیز مناسب است. از بزاق و ادرار نیز استفاده می شود، اما دقت نتیجه کمتر خواهد بود. در این محیط ها غلظت سلول های ویروسی ناچیز است.
• طیف گسترده ای از تجزیه و تحلیل. یک نمونه از مواد زیستی را می توان برای چندین بیماری آزمایش کرد.
• سرعت اجرا. واکنش زنجیره ای پلیمراز یک روش تشخیصی فوری است. شما می توانید پاسخ را روز بعد پیدا کنید.
• اعتماد به نفس 80 درصد است. با استفاده از روش PCR می توان ذرات ویروسی را حتی اگر غلظت آنها کم باشد، شناسایی کرد. این به شما امکان می دهد بیماری را در مراحل اولیه تشخیص دهید و درمان را به موقع شروع کنید.
• تشخیص زودهنگام عفونت HIV. زمان تشخیص HIV در خون با استفاده از PCR 10-14 روز پس از عفونت مشکوک است. این فاصله استاندارد برای تشخیص ویروس نقص ایمنی است. در این مرحله هنوز شناسایی نشده اند. روش الایزا کار نمی کند.
• هیچ محدودیت سنی وجود ندارد. این آزمایش را می توان از لحظه تولد روی کودک انجام داد.

معایب روش PCR در تشخیص HIV:

• هزینه بالاتر در مقایسه با ایمونواسی آنزیمی نسل 3.
• به تجهیزات پزشکی پیشرفته نیاز دارد.
• خطا به دلیل حساسیت بالای واکنش 20 درصد است. در بیماری های خودایمنی، تومورهای بدخیم و عفونت های مزمن، PCR می تواند نتیجه مثبت کاذب بدهد.

چه کسی به PCR نیاز دارد؟

• پاسخ زودهنگام برای تشخیص اولیه مورد نیاز است. PCR به تایید یا رد نتایج ELISA کمک می کند.
• ایمونوبلات نتیجه مثبت داد. اگر ابتدا آنالیز PCR انجام شود، تأیید نتیجه توسط ایمونوبلات الزامی است. تحقیقات مکمل یکدیگر هستند. پزشکان با استفاده همزمان از 2 روش احتمال خطا را از بین می برند.
• پس از تایید مثبت، PCR به پایش اثربخشی درمان کمک می کند.
• برای آزمایش وجود خون اهداکننده استفاده می شود.
• PCR حتی برای کودکان زیر یک سال نیز قابل انجام است. این روش برای اطلاع از وضعیت HIV در نوزادانی که مادرانشان ناقل این ویروس هستند استفاده می شود. آزمایشی که در روزهای اول زندگی انجام می شود نشان می دهد که آیا عفونت داخل رحمی رخ داده است یا خیر. عفونت ممکن است زمانی رخ دهد که کودک از کانال زایمان عبور می کند. به دست آمده توسط کودک در طول زایمان را می توان پس از 2 تا 3 هفته شناسایی کرد.

چقدر طول می کشد تا آزمایش PCR انجام شود و از کجا می توانم آن را دریافت کنم؟

انجام آزمایش PCR برای HIV و رمزگشایی نتایج به زمان زیادی نیاز ندارد. جمع آوری خون 5-7 دقیقه طول می کشد. در حالت استاندارد، تکنسین آزمایشگاه فقط 24 ساعت برای تهیه گواهی نیاز دارد. تشخیص بیش از 8 ساعت طول نمی کشد، بقیه زمان برای ثبت نام لازم است. بیمار گزارش را در روز کاری بعد دریافت می کند. در عرض 2 ساعت انجام دهید

آزمایش اچ آی وی به این روش تحت بیمه نامه پزشکی اجباری انجام نمی شود. شما نمی توانید این خدمات را به صورت رایگان در یک کلینیک عمومی دریافت کنید. اما تقریباً تمام آزمایشگاه های تجاری معمولاً تجهیزات و معرف های لازم را دارند. آزمایش PCR اغلب در غربالگری عمومی HIV گنجانده می شود. قیمت تشخیص پیچیده از 600 تا 1000 روبل متغیر است.

شما می توانید این روش را به صورت ناشناس تکمیل کنید. در پذیرش، یک شماره فردی به بیمار داده می شود که از طریق آن نتیجه را متوجه می شود. مراکز پزشکی مدرن تمام داده های وب سایت خود را در حساب شخصی مشتری نمایش می دهند.

.

عفونت HIV یک بیماری ویروسی شدید با دوره بدون علامت طولانی است که با آسیب به سیستم ایمنی بدن انسان مشخص می شود و به دلیل تشخیص دیرهنگام آن خطرناک است. اغلب اصطلاحات "اچ آی وی" و "ایدز" به عنوان مترادف استفاده می شود، اما در واقع، ایدز آخرین مرحله (آخرین) عفونت HIV است که مدت آن 1-2 سال است. طبق تحقیقات، از لحظه ابتلا تا زمانی که بیماری در صورت عدم درمان وارد مرحله نهایی شود، به طور متوسط ​​11-9 سال می گذرد. تشخیص زودهنگام بیماری با استفاده از آنالیز ELISA یا PCR برای HIV به شما این امکان را می دهد که علیرغم وجود ویروس نقص ایمنی انسانی در بدن، درمان ضد رتروویروسی را به موقع شروع کنید، پیشرفت بیماری را متوقف کنید و زندگی کاملی را برای سالیان متمادی داشته باشید.

راه های انتقال اچ آی وی:

• رابطه جنسی محافظت نشده؛
• انتقال خون و فرآورده های خونی؛
• استفاده از ابزار غیر استریل در مداخلات پزشکی؛
• صدمات به پرسنل پزشکی با ابزار غیر استریل؛
• عفونت پری ناتال: انتقال ویروس در دوران بارداری و زایمان.

آزمایش های ایدز (HIV) تجویز می شود:

• در طول تماس جنسی گاه به گاه؛
• هنگام برنامه ریزی بارداری و در دوران بارداری؛
• در آماده سازی برای بستری شدن در بیمارستان؛
• با کاهش وزن ناگهانی؛
• با افزایش طولانی مدت دمای بدن با منشا ناشناخته.

آزمایش خون سریع برای HIV

HIV متعلق به خانواده رتروویروس ها (Retroviridae)، زیر خانواده لنتی ویروس ها (Lentivirus) است. هنگامی که وارد بدن انسان می شود، سلول های سیستم ایمنی را تحت تأثیر قرار می دهد: سلول های T-helper، ماکروفاژها و سلول های دندریتیک. رتروویروس RNA خود را به قطعه ای از DNA تبدیل می کند که در ژنوم سلول میزبان ادغام می شود. هنگامی که سلول آسیب دیده تقسیم می شود، سلول های دختر ژنوم ویروس را دریافت می کنند. بدن آنتی‌بادی‌هایی را علیه آنتی‌ژن‌های ویروس در سطح سلول‌های آلوده تولید می‌کند، که تشخیص آن برای تشخیص عفونت HIV با استفاده از روش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA) استفاده می‌شود. توصیه می شود آزمایش را 1.5 تا 3 ماه پس از لحظه مشکوک به عفونت انجام دهید، آزمایش الایزا قبل از آن آموزنده نیست. آزمایشگاه Gemotest از یک روش جایگزین استفاده می کند، Real-Time PCR (PCR با تشخیص محصولات در زمان واقعی)، که نه آنتی بادی های HIV، بلکه خود ویروس را در بدن تشخیص می دهد. این روش با داشتن حساسیت و قابلیت اطمینان بالا به شما امکان می دهد حتی ذرات منفرد ویروس را پس از 10 روز (به طور متوسط) از لحظه عفونت احتمالی، زمانی که هنوز هیچ آنتی بادی در خون وجود ندارد، شناسایی کنید.

• برای شناسایی ویروس در طول "پنجره سرم منفی"؛
• اگر نتیجه ایمونوبلات مشکوک باشد.
• برای تعیین ژنوتیپ ویروس - HIV-1 یا HIV-2؛
• برای کنترل بار ویروسی روی بدن؛
• برای تعیین وضعیت HIV در نوزادان در صورتی که مادر آلوده به HIV باشد.
• بعد از تزریق خون

آزمایش HIV ناشناس

طبق بند 2، ماده 8 قانون فدرال فدراسیون روسیه شماره 38-FZ، بیمار می تواند به طور ناشناس آزمایش HIV را انجام دهد و نتیجه را با استفاده از شماره سفارش فردی دریافت کند که مشمول افشا نیست. به کسانی که بنا به دلایلی نمی توانند برای معاینه به یکی از بخش های آزمایشگاه هموتست مراجعه کنند، توصیه می کنیم از خدمات پرستاری که برای خونگیری مراجعه می کنند استفاده کنند و نمونه گرفته شده را به عنوان سفارش ناشناس ثبت کنند.

توجه خود را به:از نتایج آزمایشات ناشناس برای ایدز (HIV) نمی توان برای معاینات حرفه ای، بستری شدن در بیمارستان یا ارائه به پزشک معالج در یک کلینیک استفاده کرد.

نتایج آزمایش HIV، صرف نظر از نتیجه آنها، تنها در صورتی صادر می شود که بیمار شخصاً با بخش آزمایشگاه تماس بگیرد. هنگام معاینه افراد خردسال (زیر 14 سال) - به نماینده قانونی مشخص شده در دستور.

نتایج با ارائه قرارداد، برآورد و مدرک شناسایی خود بیمار یا نماینده بیمار مشخص شده در دستور صادر می شود.

نتایج تحقیقات از طریق تلفن یا ایمیل مخابره نمی شود.

اگر آزمایش اچ‌آی‌وی برای اهداف آماده‌سازی برای بستری شدن در بیمارستان یا برای ارائه در یک مرکز بهداشتی درمانی تجویز شده باشد، ثبت درخواست‌ها برای آن با رعایت داده‌های اجباری زیر توسط بیمار انجام می‌شود:

1) برای ساکنان مسکو و منطقه مسکو

• نام و نام خانوادگی
• روز، ماه و سال تولد
• اطلاعات ثبت نام
• گذرنامه
• بیمه نامه (سری و شماره بیمه نامه، نام شرکت بیمه).

2) برای ساکنان سایر مناطق فدراسیون روسیه و شهروندان خارجی، علاوه بر این - یک فتوکپی (اسکن) از گذرنامه.

• نام و نام خانوادگی
• روز، ماه و سال تولد
• اطلاعات ثبت نام
• بیمه نامه (سری و شماره بیمه نامه، نام شرکت بیمه)
• فتوکپی (اسکن) پاسپورت

آزمایش HIV چقدر طول می کشد؟

نتایج آزمایش ELISA را می توان در عرض 1 روز کاری به دست آورد، اما نه زودتر از 1.5-3 ماه از تاریخ مشکوک به عفونت؛ نتیجه تشخیص PCR را می توان ظرف 10 روز از تاریخ مشکوک به عفونت دریافت. زمان انجام تست Real-Time PCR 3 روز کاری است.